基础研究
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世界华人消化杂志. 2011-07-18; 19(20): 2109-2115
Published online 2011-07-18. doi: 10.11569/wcjd.v19.i20.2109
Conophylline联合Betacellulin-δ4对胎猪导管源胰腺干细胞体外诱导分化的促进作用
黄跃南, 郭欣
黄跃南, 哈尔滨医科大学附属二院普外三科 黑龙江省哈尔滨市 150086
郭欣, 哈尔滨医科大学附属一院普外五科 黑龙江省哈尔滨市 150001
黄跃南, 副教授, 副主任医师, 主要从事胰腺干细胞的基础与临床研究.
基金项目: 黑龙江省自然科学基金资助项目, No. D2007-05.
作者贡献分布: 黄跃南与郭欣对此文所作贡献均等; 此课题由黄跃南与郭欣设计; 研究过程由黄跃南与郭欣操作完成; 研究所用新试剂及分析工具由黄跃南提供; 数据分析由郭欣完成; 本论文写作由黄跃南与郭欣完成.
通讯作者: 黄跃南, 副教授, 副主任医师, 150086, 黑龙江省哈尔滨市, 哈尔滨医科大学附属二院普外三科. dr-huangyuenan@163.com
电话: 0451-86605575
收稿日期: 2011-05-08
修回日期: 2011-06-19
接受日期: 2011-06-21
在线出版日期: 2011-07-18
Abstract

目的: 研究Conophylline(CnP)联合Betacellulin-δ4(BTCδ4)对胎猪导管源胰腺干细胞的体外诱导分化作用.

方法: 在培养基中加入CnP、BTCδ4等诱导因子诱导胎猪导管源胰腺干细胞分化, 台盼蓝检测CnP对胰岛样细胞团(islet-like cell cluster, ICC)的毒性, ICC行ELISA、免疫组织化学检测, 逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR)检测胰岛素基因、PDX-1等在未诱导、诱导细胞中的表达, 葡萄糖刺激实验检测ICC分泌胰岛素的功能.

结果: 用0.1 g/L CnP诱导ICC不显示明显的细胞毒性. 诱导培养4-6 wk, ELISA和免疫组织化学显示CnP联合BTCδ4提高了胰岛素分泌细胞量和胰岛素含量; RT-PCR显示提高了PDX-1, neuroD/Beta2, 胰岛素等在ICC中的表达. 葡萄糖刺激实验结果显示, 诱导后, ICC合成、分泌胰岛素的能力显著增强(P<0.05).

结论: CnP联合BTCδ4促进诱导胎猪导管源胰腺干细胞分化为胰岛素分泌细胞, 分化细胞表达β细胞表面标志并能分泌胰岛素.

Keywords: 胎猪; 胰腺干细胞; Conophylline; Betacellulin-δ4; 胰岛素