基础研究
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世界华人消化杂志. 2011-07-08; 19(19): 1985-1989
Published online 2011-07-08. doi: 10.11569/wcjd.v19.i19.1985
siRNA沉默USP22基因对胃癌细胞增殖的抑制作用
邓美洲, 陶凯雄, 王国斌, 刘兴华
邓美洲, 陶凯雄, 王国斌, 刘兴华, 华中科技大学同济医学院附属协和医院腔镜外科 湖北省武汉市 430022
邓美洲, 在读博士, 主要从事胃肠道疾病的研究.
作者贡献分布: 此课题由邓美洲与陶凯雄设计; 研究过程由邓美洲完成; 数据分析由邓美洲与刘兴华完成; 陶凯雄与王国斌提供实验材料及分析工具, 并审阅论文、指导论文修改.
通讯作者: 陶凯雄, 教授, 主任医师, 博士生导师, 430022, 湖北省武汉市解放大道1277号, 华中科技大学同济医学院附属协和医院腔镜外科. tao_kaixiongwhuh@163.com
收稿日期: 2011-03-17
修回日期: 2011-06-04
接受日期: 2011-06-15
在线出版日期: 2011-07-08
Abstract

目的: 探讨小干扰RNA(siRNA)沉默泛素特异性肽酶22(ubiquitin specific peptidase 22, USP22)对胃癌细胞增殖的影响.

方法: 针对USP22基因设计3条siRNA及阴性siRNA, 用脂质体Lipofectamine 2000转染胃癌AGS细胞, 通过实时定量PCR和Western blot检测转染后AGS细胞USP22基因中mRNA和蛋白表达水平的变化情况, 流式细胞术检测细胞周期分布变化情况, CCK8法检测细胞增殖率及抑制率.

结果: 转染48 h后, 3条siRNA均能显著抑制USP22 mRNA和蛋白的表达. 其中, 以转染USP22 siRNA3后效果最明显, mRNA和蛋白表达分别下降80.47%±2.99%和79.40%±3.58%. 细胞增殖明显受到抑制, USP22 siRNA3组细胞增殖抑制率为27.33%±3.49%. 细胞周期中G0/G1期细胞增多, S期细胞减少.

结论: 采用RNA干扰技术能够有效地沉默USP22基因的表达, 并显著抑制胃癌细胞的增殖.

Keywords: 泛素特异性肽酶22; 小干扰RNA; 胃癌; AGS细胞; 细胞增殖