基础研究
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世界华人消化杂志. 2010-03-28; 18(9): 865-870
Published online 2010-03-28. doi: 10.11569/wcjd.v18.i9.865
无血清培养胆囊癌GBC-SD细胞形成肿瘤细胞球的鉴定
石程剑, 秦仁义, 王敏, 田锐, 张志发, 宫伟强
石程剑, 秦仁义, 王敏, 田锐, 张志发, 宫伟强, 华中科技大学同济医学院附属同济医院胆胰外科 湖北省武汉市 430030
石程剑, 华中科技大学同济医学院附属同济医院博士, 主要从事胆道胰腺肿瘤的基础和临床研究.
基金项目: 国家自然科学基金资助项目, Nos. 30600592, 30772127.
作者贡献分布: 石程剑与秦仁义对此文所作贡献均等; 此课题由石程剑、王敏及秦仁义设计; 研究过程由所有作者完成; 研究所用试剂由石程剑、王敏、张志发及宫伟强提供; 数据分析由石程剑与田锐完成; 本论文写作由石程剑完成.
通讯作者: 秦仁义, 主任医师, 教授, 博士生导师, 430030, 湖北省武汉市, 华中科技大学同济医学院附属同济医院胆胰外科. ryqin@tjh.tjmu.edu.cn
电话: 027-83663814
收稿日期: 2010-01-05
修回日期: 2010-01-29
接受日期: 2010-02-23
在线出版日期: 2010-03-28
Abstract

目的: 分离扩增肿瘤干细胞, 并鉴定其生物学性质.

方法: 用无血清培养基培养人胆囊癌GBC-SD细胞得到肿瘤细胞球. 将肿瘤细胞球传代扩增, 并用含血清培养基培养促使其分化; 将肿瘤球和普通GBC-SD细胞分别种入96孔板, MTT检测增殖能力, 并将肿瘤球和普通GBC-SD细胞分别植入裸鼠皮下, 观察移植瘤的形成; 流式细胞术检测CD15s和CD24在肿瘤球细胞和普通GBC-SD细胞中的表达, 筛选细胞表面标志物.

结果: 在无血清培养基中, 胆囊癌细胞可以形成少量的肿瘤细胞球, 并显示很强的自我更新和增殖能力, 含血清环境能够诱导其分化而贴壁生长; 在动物实验中, 肿瘤球细胞较普通GBC-SD细胞显示更强的致瘤能力(80.00% vs 10.00%, P<0.05); 标志物CD15s在肿瘤球的表达较普通GBC-SD细胞明显增高(2.56%±0.38% vs 10.77%±0.93%, t = 18.25, P<0.05).

结论: 人胆囊癌细胞GBC-SD的肿瘤干细胞可以通过无血清培养环境来分离和扩增, CD15s可能为其细胞表面标志物.

Keywords: 胆囊癌; GBC-SD细胞系; 无血清培养基; 肿瘤干细胞; 细胞表面标志物