基础研究
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世界华人消化杂志. 2010-03-08; 18(7): 652-656
Published online 2010-03-08. doi: 10.11569/wcjd.v18.i7.652
HH胶囊体外抗乙型肝炎病毒的作用及其机制
张传涛, 廖志航, 吴疆, 范昕建, 孟宪丽, 陈东辉
张传涛, 范昕建, 孟宪丽, 成都中医药大学 四川省成都市 610075
廖志航, 陈东辉, 四川省中医药科学院 四川省成都市 610041
吴疆, 四川大学华西医院 四川省成都市 610041
张传涛, 博士, 主要从事中医药防治病毒性肝炎研究.
基金项目: 国家"十一五"科技支撑计划基金资助项目, No. 2007BAI40B03; 成都中医药大学博士研究生创新基金资助项目.
作者贡献分布: 张传涛与范昕建对此文贡献均等; 此课题由张传涛与范昕建设计; 研究过程由张传涛与吴疆操作完成; 药物制备由孟宪丽指导完成; 研究所用试剂及分析工具由廖志航与陈东辉提供; 数据分析由陈东辉与廖志航完成; 本论文写作由张传涛与范昕建完成; 吴疆、廖志航及陈东辉负责文献检索.
通讯作者: 范昕建, 教授, 博士, 610075, 四川省成都市十二桥路37号, 成都中医药大学. zct801012@126.com
电话: 028-66990507
收稿日期: 2009-12-05
修回日期: 2010-01-05
接受日期: 2010-01-19
在线出版日期: 2010-03-08
Abstract

目的: 研究HH胶囊体外抗乙型肝炎病毒的作用及其对抗病毒蛋白2'5'-寡腺苷酸合成酶(2'5'-Oligoadenylate Synthetase, 2'5'-OAS)、RAN依赖蛋白激酶(RAN-dependent protein kinase, PKR)的影响.

方法: HepG2.2.15是目前最常用的乙型肝炎病毒感染的体外实验模型, 将细胞随机分为空白对照组、阳性对照组(3TC)、不同浓度的HH胶囊组. 用CCK-8检测药物细胞毒性, 酶联免疫法检测乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)和乙型肝炎病毒e抗原(HBeAg); 荧光定量聚合酶链反应法检测乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸(HBV DNA); 用Western blot、荧光定量PCR方法分别检测细胞内抗病毒蛋白2'5'-OAS、PKR及其mRNA水平.

结果: HH胶囊的TC50是2.11 g/L、312.00 mg/L、156.00 mg/L、78.00 mg/L、39.00 mg/L HH胶囊均可以降低细胞外HBeAg(0.285±0.007, 0.462±0.008, 0.565±0.009, 0.733±0.008 vs 1.334±0.007)和HbsAg(0.834±0.008, 1.021±0.011, 1.347±0.017, 1.548±0.015 vs 2.593±0.008)水平, 312.00 mg/L、156.00 mg/L HH胶囊均可以减低细胞内乙型肝炎病毒DNA[(3.423±0.110)×109 copies/L, (3.640±0.082)×109 copies/L vs (6.857±0.060)×109copies/L]、细胞外乙型肝炎病毒DNA(6 547±87、7 710±62 vs 24 300±200), 312.00 mg/L HH胶囊可以增加细胞内OAS mRNA(0.885±0.038 vs 0.688±0.068)、PKR mRNA(0.139±0.06 vs 0.058±0.005)表达及其OAS、PKR蛋白水平.

结论: HH胶囊具有良好的抗乙型肝炎病毒作用, 推测可能与增加细胞内OAS、PKR及其mRNA水平有关.

Keywords: HH胶囊; 乙型肝炎病毒; 寡腺苷酸合成酶; RAN依赖蛋白激酶