丹皮酚联合5-FU对食管癌EC9706细胞增殖及凋亡的影响

Abstract

目的: 探讨丹皮酚(paeonol, Pae)单独及联合5-FU对人食管癌EC9706细胞的增殖抑制及凋亡诱导作用.

方法: 采用6种浓度的Pae(7.81、15.63、31.25、62.50、125.00、250.00 mg/L)、3种浓度的5-FU(12.50、25.00、50.00 mg/L)及Pae(31.25 mg/L)和5-FU(12.50 mg/L)联合分别处理EC9706细胞24、48、72 h, 同时设对照组(细胞不做处理), 采用MTT法检测各个时间段细胞的增殖情况; 采用流式细胞术检测4种浓度的Pae(31.25、62.50、125.00、250.00 mg/L)处理EC9706细胞72 h后细胞周期的变化; 倒置显微镜下观察各Pae组细胞各时间段形态学变化, HE染色光镜下观察凋亡细胞; 采用免疫细胞化学法检测经Pae(31.25 mg/L)、5-FU(12.50 mg/L)单独和联合作用48 h后细胞中凋亡相关蛋白Bcl-2及Bax的表达.

结果: Pae、5-FU可明显抑制EC9706细胞增殖, 并随着浓度的增加和作用时间的延长而增强(P<0.05), Pae与5-FU联合用药比单用Pae或5-FU抑制效果更明显(P<0.05); Pae作用后EC9706细胞中G₀/G₁期和G₂/M期细胞比例下降, S期细胞比例上升(Pae 125.00 mg/L组: G₀/G₁期21.18%±2.28% vs 62.17%±5.23%、G₂/M期0.76%±0.54% vs 9.92%±3.10%、S期78.06%±2.82%vs 27.91%±2.13%, 均P<0.05); HE染色光镜下可见典型的肿瘤细胞凋亡改变; Pae、5-FU可下调EC9706细胞中Bcl-2蛋白表达, 同时增强EC9706细胞中Bax蛋白的表达, 联合用药组较单药组作用更为明显(2.21±0.14 vs 5.67±0.30, 4.22±0.34; 8.55±0.33 vs 3.90±0.27, 6.28±0.26, 均P<0.05).

结论: Pae可明显抑制人食管癌EC9706细胞的增殖, 促进其凋亡, Pae联合5-FU作用更为明显.

Keywords: 丹皮酚; 5-氟尿嘧啶; 食管癌; 增殖; 凋亡; Bcl-2; Bax