Published online 2010-11-28. doi: 10.11569/wcjd.v18.i33.3559
修回日期: 2010-08-29
接受日期: 2010-09-07
在线出版日期: 2010-11-28
目的: 比较UW液零下非结冰(-0.8 ℃)保存后C3A与L-02细胞的生物学特性, 探索其对生物人工肝的应用价值.
方法: 贴壁培养C3A与L-02细胞, 0.25%胰酶消化, 制备成细胞悬液, 细胞浓度调至2×109/L, 分装至2 mL冻存管, UW液-0.8 ℃保存0、24、48及72 h后, 分别测定细胞存活率与凋亡率、AST与LDH释放、尿素合成功能及白蛋白分泌功能.
结果: 随着低温保存时间的延长, 细胞存活率逐渐下降, 但72 h C3A细胞存活率明显高于L-02细胞(86.49%±2.80% vs 70.17%±2.82%, P<0.001); 细胞凋亡率亦逐渐上升, 但72 h C3A细胞凋亡率低于L-02细胞(1.26%±0.84% vs 5.73%±1.68%,P<0.001); AST及LDH的释放量逐渐增加, 但72 h C3A细胞低于L-02细胞(4.61 U/L±0.43 U/L vs 6.22 U/L±0.65 U/L,P<0.001; 86.10 U/L±11.10 U/L vs 113.88 U/L±5.64 U/L, P<0.001). 尿素合成功能呈下降的趋势, 但72 h L-02细胞明显优于C3A细胞(1.01 mmol/L±0.14 mmol/L vs 0.60 mmol/L±0.06 mmol/L, P<0.001). 白蛋白分泌功能逐渐降低, 但72 h C3A细胞明显优于L-02细胞(2.060 g/L±0.220 g/L vs 9.04 mg/L±0.53 mg/L, P<0.001).
结论: UW液-0.8 ℃保存C3A与L-02细胞72 h仍然可以满足生物人工肝支持系统的需要. 以L-02细胞为材料的人工肝可能更适用于肝衰竭合并肝性脑病, 以C3A细胞为材料的人工肝可能更适用于肝衰竭合并低白蛋白血症.