基础研究
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世界华人消化杂志. 2010-09-08; 18(25): 2637-2641
Published online 2010-09-08. doi: 10.11569/wcjd.v18.i25.2637
互隔交链孢霉素活化NIH3T3细胞中蛋白激酶A
刘康栋, 王瑾瑾, 赵继敏, 杨洪艳, 黄幼田, 郑智敏, 董子明
刘康栋, 王瑾瑾, 赵继敏, 杨洪艳, 黄幼田, 郑智敏, 董子明, 郑州大学基础医学院病理生理教研室 河南省郑州市 450001
刘康栋, 博士, 讲师, 主要从事食管癌发病机制和化学预防的研究.
基金项目: 国家自然科学基金面上资助项目, No. 30471952; 河南省自然科学基金资助项目, No. 2007310020.
作者贡献分布: 此课题由董子明、刘康栋及赵继敏设计; 研究过程由刘康栋、王瑾瑾、赵继敏、杨洪艳、黄幼田及郑智敏操作完成; 数据分析由刘康栋与王瑾瑾完成; 本论文写作由刘康栋、王瑾瑾、赵继敏及董子明完成.
通讯作者: 董子明, 教授, 450001, 河南省郑州市科学大道100号, 郑州大学基础医学院病理生理学教研室. dongzm@zzu.edu.cn
收稿日期: 2010-06-30
修回日期: 2010-07-30
接受日期: 2010-08-10
在线出版日期: 2010-09-08
Abstract

目的: 观察互隔交链孢霉素(ALT)对NIH3T3细胞中蛋白激酶A(PKA)活化的影响.

方法: 15 μmol/L ALT作用NIH3T3细胞1 h, 同时设烷化剂甲璜酸甲酯(MMS)为阳性对照, 二甲亚枫(DMSO)为溶剂对照组. 用免疫荧光、免疫细胞化学染色法和Western blot方法检测磷酸化PKA催化亚基表达水平. 利用PKA特异性抑制剂10 μmol/L H89预处理细胞1 h, 再进行15 μmol/L ALT刺激实验.

结果: 免疫荧光结果表明, ALT作用后, PKA活化、催化亚基转位入核. 免疫细胞化学结果和Western blot显示, 与溶剂对照组和H89预处理组相比较, ALT组、MMS组的细胞中磷酸化PKA催化亚基水平明显增加(1.85±0.22, 1.97±0.05 vs 1.43±0.08, 1.63±0.13, P<0.05; 0.89±0.09, 0.96±0.10 vs 0.13±0.07, 0.39±0.10, P<0.05).

结论: 一定浓度的ALT能够诱导NIH3T3细胞中PKA活化, H89能降低ALT对PKA的活化作用.

Keywords: 互隔交链孢霉素; 蛋白激酶A; H89; 信号转导通路