研究快报
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世界华人消化杂志. 2010-08-28; 18(24): 2584-2588
Published online 2010-08-28. doi: 10.11569/wcjd.v18.i24.2584
酵母双杂交技术筛选人巨细胞病毒UL131A的相互作用蛋白
任高伟, 崔鑫, 齐莹, 马艳萍, 阮强, 孙峥嵘
任高伟, 崔鑫, 齐莹, 马艳萍, 阮强, 孙峥嵘, 中国医科大学附属盛京医院病毒研究室 辽宁省沈阳市 110004
基金项目: 国家自然科学基金资助项目, No. 30770109.
作者贡献分布: 本课题设计和书写由任高伟与孙峥嵘完成; 实验操作由任高伟、崔鑫及孙峥嵘完成; 齐莹、马艳萍及阮强参与实验设计.
通讯作者: 孙峥嵘, 研究员, 110004, 辽宁省沈阳市, 中国医科大学附属盛京医院病毒研究室. sunzr@sj-hospital.org
电话: 024-96615-13447
收稿日期: 2010-04-13
修回日期: 2010-06-18
接受日期: 2010-06-28
在线出版日期: 2010-08-28
Abstract

目的: 利用酵母双杂交系统从人胎脑cDNA文库中筛选与人巨细胞病毒(HCMV)UL131A编码蛋白相互作用的蛋白.

方法: 将成功构建的酵母诱饵表达载体pGBKT7-UL131A转化到酵母菌AH109中, 再将人胎脑文库DNA转化到含有pGBKT7-UL131A的酵母细胞中, 筛选与HCMV UL131A编码蛋白相互作用的细胞蛋白, 并对筛选得到的阳性克隆进行测序和生物信息学分析.

结果: 成功构建酵母诱饵表达载体pGBKT7-UL131A, 并将其与人胎脑cDNA文库共转化到酵母细胞AH109中, 最终确认有23种人胎脑文库蛋白与HCMV UL131A编码蛋白相互作用, 其中一种与Thy-1蛋白高度同源, 其同源性高达99%.

结论: 成功应用酵母双杂交系统筛选出与HCMV UL131A编码蛋白相互作用的蛋白, 其中Thy-1在HCMV感染致病过程中可能起重要作用.

Keywords: 人巨细胞病毒; UL131A 蛋白; 酵母双杂交系统; 人胎脑cDNA文库