研究快报
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世界华人消化杂志. 2010-08-28; 18(24): 2574-2578
Published online 2010-08-28. doi: 10.11569/wcjd.v18.i24.2574
胰腺细胞中与HCV NS2蛋白相互作用蛋白中代谢相关基因的筛选
吴扬, 张锦前, 宁明
吴扬, 宁明, 清华大学第一附属医院 北京市 100016
张锦前, 北京地坛医院传染病研究所 北京市 100015
基金项目: 国家自然科学基金资助项目, No. 30600524.
作者贡献分布: 此课题由张锦前设计; 研究过程由吴扬与张锦前操作完成; 数据分析由吴扬与张锦前完成; 本论文写作由吴扬、张锦前及宁明完成.
通讯作者: 宁明, 副主任医师, 100016, 北京市朝阳区酒仙桥一街坊6号, 清华大学第一附属医院. ningming1956@yahoo.cn
电话: 010-64308585
收稿日期: 2010-05-27
修回日期: 2010-07-10
接受日期: 2010-07-21
在线出版日期: 2010-08-28
Abstract

目的: 研究人胰腺细胞中与丙型肝炎病毒(HCV)包膜糖蛋白NS2相互作用的结合蛋白中的代谢相关基因.

方法: 扩增人胰腺细胞cDNA文库并进行纯化鉴定, 将文库质粒转化酵母菌株Y187. 诱饵质粒pGBKT7-NS2转化酵母菌株AH109, 在色氨酸缺陷型培养基(SD/-Trp)上筛选阳性菌落. 应用酵母双杂交系统3将阳性重组AH109菌株与重组酵母菌株Y187进行配合, 在4缺培养基(SD/-Trp/-Leu/-His/-Ade)和铺有X-α-gal的4缺培养基上进行筛选, 提取蓝色酵母菌落质粒, 电转化大肠埃希菌DH5α后再提取质粒测序. 测序结果进行序列比对.

结果: 成功构建人胰腺cDNA文库以及pGBKT7-HCV NS2重组质粒, 筛选出7种与HCV NS2蛋白相结合的蛋白基因.

结论: 筛选出的与HCV NS2蛋白结合的部分人胰腺细胞蛋白基因与糖、脂类代谢密切相关.

Keywords: 胰腺细胞; 丙型肝炎病毒; 胰腺细胞cDNA文库; 酵母双杂交