基础研究
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世界华人消化杂志. 2010-08-08; 18(22): 2317-2321
Published online 2010-08-08. doi: 10.11569/wcjd.v18.i22.2317
JAK2、ERK1干扰对幽门螺杆菌毒素相关蛋白CagA调控胃泌素基因表达的影响
谢渊, 周建奖, 赵艳, 汪苏, 陈娴
谢渊, 赵艳, 汪苏, 陈娴, 贵阳医学院分子生物学重点实验室 贵州省贵阳市 550004
周建奖, 贵阳医学院附属医院 贵州省贵阳市 550004
谢渊, 硕士, 副教授, 主要从事肿瘤分子生物学研究.
基金项目: 国家自然科学基金资助项目, No. 30560038; 贵州省科学技术基金资助项目, No. 黔科合J字[2007] 2084; 贵州省国际科技合作基金资助项目, No. 黔科合外G字[2008] 700119.
作者贡献分布: 谢渊与周建奖对此文所作贡献均等; 此课题由周建奖设计; 研究过程由谢渊、赵艳、汪苏及陈娴完成; 研究所用新试剂及分析工具由周建奖提供; 数据分析由谢渊完成; 本论文写作由谢渊与周建奖完成.
通讯作者: 周建奖, 教授, 550004, 贵州省贵阳市, 贵阳医学院附属医院. jianjiangzhou@gmail.com
电话: 0851-6752814
收稿日期: 2010-04-23
修回日期: 2010-07-03
接受日期: 2010-07-05
在线出版日期: 2010-08-08
Abstract

目的: 探讨JAK/STAT3和MAPK/ERK两条信号转导通路在分析和推断CagA调控胃泌素基因表达机制中的作用.

方法: 将含caga基因的表达质粒和幽门螺杆菌(CagA阳性)株分别转染和感染胃癌细胞AGS和SGC-7901, 同时用siRNA阻断jak2及erk1基因的表达, 48 h后通过RT-PCR、Western blot检测细胞中有无CagA蛋白表达, 实时荧光定量PCR检测胃泌素的变化.

结果: 转染组和感染组中均检测到CagA蛋白的表达, 与对照相比胃泌素mRNA在转染组分别增加了26.58倍(AGS细胞)和5.59倍(SGC-7901), 在感染组分别增加1.88倍(AGS细胞)和8.59倍(SGC-7901), 表达量显著增高; siRNA干扰JAK2和ERK1后胃泌素mRNA表达量降低, 在转染组JAK2干扰抑制率分别为81.50%(AGS)和99.00%(SGC-7901), ERK1干扰抑制率分别75.55%(AGS)和97.00%(SCG-7901). 在感染组JAK2干扰抑制率分别为55.30%(AGS)和90.00%(SGC-7901), ERK1干扰抑制率分别38.30%(AGS)和92.00%(SGC-7901). 结果显示ERK/MAPK和JAK/STAT通路阻断, 抑制了CagA调控的胃泌素mRNA表达.

结论: CagA上调胃泌素基因的表达, siRNA干扰阻断JAK/STAT和ERK/MAPK这两个信号通路, 可以抑制CagA对胃泌素mRNA表达的调控.

Keywords: 信号通路; RNA干扰; 幽门螺杆菌毒素相关蛋白; 胃泌素