临床研究
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世界华人消化杂志. 2010-06-28; 18(18): 1902-1906
Published online 2010-06-28. doi: 10.11569/wcjd.v18.i18.1902
MicroRNA-377和组蛋白甲基转移酶SMYD3在肝细胞癌中的表达及两者的相关性
王冬冬, 江红, 赵文月, 宋孟锜, 由法平, 杨永飞, 陈立波, 杨炼
王冬冬, 赵文月, 宋孟锜, 由法平, 杨永飞, 陈立波, 杨炼, 华中科技大学同济医学院附属协和医院肝胆中心 湖北省武汉市 430022
江红, 湖北省荆州市第三医院 湖北省荆州市 430000
王冬冬, 2008级在读硕士, 主要从事肝脏肿瘤疾病的研究.
基金项目: 国家自然科学基金资助项目, No. 30672067, No. 30700190; 教育部新世纪优秀人才支持计划基金资助项目, No. NCET -07-318
作者贡献分布: 王冬冬与赵文月对此文所作贡献均等; 此课题由王冬冬、赵文月、江红、陈立波及杨炼设计; 实验过程由王冬冬、赵文月及宋孟锜操作完成; 研究所用新试剂及分析工具由由法平与杨永飞提供; 数据分析由王冬冬与宋孟锜完成; 本论文写作由王冬冬、江红、赵文月及陈立波完成.
通讯作者: 陈立波, 教授, 主任医师, 430022, 湖北省武汉市解放大道1277号, 华中科技大学同济医学院附属协和医院肝胆外科中心. libo_chen@hotmail.com
电话: 027-85351623
收稿日期: 2010-03-06
修回日期: 2010-05-06
接受日期: 2010-05-18
在线出版日期: 2010-06-28
Abstract

目的: 探讨microRNA-377(miR-377)与组蛋白甲基转移酶SMYD3在肝癌中的表达规律及与肝癌的相关性. 

方法: 利用实时定量PCR分别检测不同肝组织及肝细胞系中miR-377表达水平, 应用实时定量PCR和Western blot分别检测不同肝组织及肝细胞系中SMYD3 mRNA和蛋白水平的表达情况. 通过转染miR-377模拟物上调其在肝癌细胞株HepG2中表达后, 应用实时定量PCR、Western blot分别检测转染前后HepG2中SMYD3 mRNA和蛋白表达的变化. 

结果: MiR-377 mRNA在人肝癌旁组织和肝癌组织中的表达较正常肝脏明显降低(0.331±0.059, 0.139±0.064 vs 0.874±0.178, 均P<0.05); 在HepG2中的表达较L-02明显降低(0.145±0.021 vs 0.868±0.194, P<0.05). SMYD3 mRNA和蛋白质在人肝癌旁组织和肝癌组织中的表达较正常肝脏明显升高(mRNA: 3.836±0.137, 5.836±0.965 vs 1.235±0.332; 蛋白: 0.381±0.020, 0.484±0.030 vs 0.252±0.015; 均P<0.05). SMYD3 mRNA和蛋白质在肝癌细胞系HepG2中的表达较正常肝细胞系L-02明显升高(mRNA: 0.845±0.047 vs 0.348±0.134; 蛋白: 0.575±0.008 vs 0.259±0.007, 均P<0.05). 转染miRNA-377模拟物上调HepG2中miR-377表达后转染组SMYD3 mRNA和蛋白表达较空白组和阴性对照组均明显下降(mRNA: 0.125±0.010 vs 0.857±0.163, 0.779±0.167; 蛋白: 0.092±0.026 vs 0.347±0.040, 0.383±0.054, 均P<0.05).

结论: miRNA-377在肝癌中表达明显下调, 其靶基因SMYD3表达上调; 表达下调的miRNA-377丧失对SMYD3表达的抑制可能是肝癌发生的重要机制.

Keywords: 微小RNA-377; 组蛋白甲基转移酶SMYD3; 肝细胞癌