Published online 2010-05-08. doi: 10.11569/wcjd.v18.i13.1313
修回日期: 2010-04-15
接受日期: 2010-04-20
在线出版日期: 2010-05-08
目的: 探讨人食管癌细胞株EC109蛋白酶激活受体-2(PAR-2)的表达, 以及内源性PAR-2激动剂胰蛋白酶和PAR-2激动肽SLIGKV对该细胞侵袭转移的影响及其可能的分子机制.
方法: 采用RT-PCR法和免疫细胞化学染色法检测EC109细胞中PAR-2 mRNA及蛋白的表达情况; 胰蛋白酶和SLIGKV对细胞施加干预后, MTT法检测细胞增殖情况, Transwell小室法检测细胞侵袭和迁移能力的变化, RT-PCR法检测PAR-2、MMP-2/MMP-9 mRNA表达的变化, 明胶酶谱法检测MMP-2、MMP-9明胶酶活性的变化.
结果: 食管癌细胞EC109在胰蛋白酶和SLIGKV刺激后, PAR-2 mRNA表达较对照组显著上调(0.781±0.045、0.653±0.029 vs 0.491±0.032, 均P<0.01); 胰蛋白酶在1-10 nmol/L、SLIGKV在1-50 μmol/L时可促进细胞增殖(P<0.01或0.05), 呈剂量依赖性; Transwell小室实验中胰蛋白酶组及SLIGKV组的细胞侵袭和迁移能力显著高于对照组及反肽组(72.5±9.2、59.4±8.7 vs 31.6±6.6、36.2±9.8, 均P<0.01); 胰蛋白酶及PAR-2激动肽作用后细胞MMP-9 mRNA的表达量明显高于对照组及反激动肽组(0.719±0.034、0.466±0.042 vs 0.341±0.032、0.370±0.021, 均P<0.01), 细胞水解明胶的能力也明显高于对照组及反激动肽组(75.6±6.1、60.4±4.6 vs 44.9±4.2、39.3±5.2, 均P<0.01). 而对MMP-2的mRNA表达和水解明胶的能力无明显影响(P>0.05).
结论: 食管癌EC109细胞表达PAR-2受体, 且内源性PAR-2激动剂胰蛋白酶和PAR-2激动肽SLIGKV可能通过激活PAR-2受体上调MMP-9表达, 进而促进食管癌细胞侵袭转移.