Copyright
©The Author(s) 2010. Published by Baishideng Publishing Group Inc. All rights reserved.
世界华人消化杂志. 2010-04-28; 18(12): 1211-1216
Published online 2010-04-28. doi: 10.11569/wcjd.v18.i12.1211
Published online 2010-04-28. doi: 10.11569/wcjd.v18.i12.1211
高糖对体外培养的Cajal间质细胞P2X7嘌呤能受体表达的影响
高显奎, 余跃, 杨琰, 陈军, 王巧民, 安徽医科大学附属省立医院消化内科 安徽省合肥市 230001
高显奎, 安徽医科大学在读硕士, 研究方向为胃肠疾病基础与临床.
基金项目: 安徽省自然科学基金资助项目, No. 070413142.
作者贡献分布: 此课题由余跃、高显奎及王巧民设计; 研究过程由高显奎、杨琰及陈军完成; 研究所用试剂及分析工具由余跃与高显奎提供; 数据分析由高显奎与余跃完成; 本论文写作由高显奎与余跃完成.
通讯作者: 余跃, 教授, 主任医师, 230001, 安徽省合肥市庐江路17号, 安徽医科大学附属省立医院消化内科. yuyuemd@yahoo.com.cn
电话: 0551-2283380
收稿日期: 2010-01-28
修回日期: 2010-04-07
接受日期: 2010-04-13
在线出版日期: 2010-04-28
修回日期: 2010-04-07
接受日期: 2010-04-13
在线出版日期: 2010-04-28
Abstract
目的: 观察P2X7嘌呤能受体在体外培养的Cajal间质细胞(ICC)的表达及高糖的影响, 探讨P2X7嘌呤能受体在糖尿病胃肠功能紊乱的细胞机制.
方法: 以小鼠小肠组织为来源, 联合使用机械分离法和酶解法分离ICC, 培养在50 mL/L CO2温箱里. 同时应用ICC特异的c-Kit抗体和P2X7受体抗体进行免疫荧光染色, 在激光共聚焦显微镜下进行鉴定, 以确定P2X7受体是否表达于ICC. 实验分组: 正常对照组(葡萄糖浓度为5.5 mmol/L), 高糖组(葡萄糖浓度为33 mmol/L). 通过倒置显微镜观察细胞形态, RT-PCR对P2X7和c-Kit受体的表达进行比较.
结果: 激光共聚焦显微镜下P2X7受体在c-Kit抗体阳性的细胞上的免疫荧光染色是阳性的; 与正常组比较, 加入葡萄糖后的ICC细胞变大, 突起变短, 与周围细胞的网络连接减少; RT-PCR结果显示P2X7受体表达于ICC, 加入高糖后的ICC的c-Kit受体表达减弱, 而P2X7受体的表达是增强的.
结论: P2X7受体表达于体外培养的ICC上, 高糖使ICC的形态发生了改变、减弱了c-Kit的表达、加强了P2X7受体的表达. 这可能在糖尿病胃肠功能紊乱的发生中发挥一定的作用.
Keywords: 高糖; Cajal间质细胞; P2X7