基础研究
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世界华人消化杂志. 2009-02-18; 17(5): 459-463
Published online 2009-02-18. doi: 10.11569/wcjd.v17.i5.459
c-myc反义寡核苷酸对结肠癌HT-29细胞增殖、凋亡及化疗敏感性的影响
邵国利, 吴爱国, 焦得闯, 纪术峰
邵国利, 吴爱国, 焦得闯, 纪术峰, 南方医科大学附属珠江医院普通外科 广东省广州市 510282
邵国利, 南方医科大学附属珠江医院普通外科在读硕士, 主要从事大肠癌基因治疗研究.
基金项目: 广东省科技计划基金资助项目, No. 2005B31201011.
作者贡献分布: 吴爱国与邵国利对此文所作贡献均等; 此课题由吴爱国指导设计; 研究过程由邵国利, 焦得闯及纪术峰操作完成; 研究所用新试剂及分析工具由纪术峰提供; 数据分析由邵国利焦得闯完成; 本论文写作由邵国利完成.
通讯作者: 吴爱国, 510282, 广东省广州市工业大道中253号, 南方医科大学附属珠江医院普通外科. wagtyz@sina.com
电话: 020-61643207 传真: 020-61643207
收稿日期: 2008-12-10
修回日期: 2009-01-12
接受日期: 2009-01-19
在线出版日期: 2009-02-18
Abstract

目的: 研究体外c-myc反义寡核苷酸(ASODN)对人结肠癌HT-29细胞增殖、凋亡及化疗敏感性的影响. 

方法: 利用脂质体LipofectamineTM2000介导将c-myc ASODN转染入大肠癌HT-29细胞中, 逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)、Western blot方法检测c-myc基因mRNA及蛋白的表达, MTT、流式细胞仪(FCM)检测c-myc ASODN对人结肠癌HT-29细胞增殖抑制及其对奥沙利铂敏感性影响.  

结果: 转染c-myc ASODN后, HT-29细胞内c-myc mRNA水平显著降低(0.464±0.029 vs 0.974±0.027, 0.945±0.012, 均P<0.01). 在HT-29细胞中存在分子质量62 kDa的特异性条带, 与c-myc分子质量相符, ASODN组在PVDF膜上的特异性条带明显弱于对照组; MTT结果显示转染c-myc ASODN 48 h后的HT-29细胞的增殖速度较对照组细胞明显减慢. FCM显示c-myc ASODN转染后72 h后, 奥沙利铂+c-myc ASODN组细胞凋亡率显著高于对照组(P<0.05).

结论: 体外c-myc ASODN可抑制c-myc mRNA及蛋白的表达, 阻断c-myc可抑制HT-29细胞增殖并增强其对奥沙利铂的敏感性, 可能为大肠癌的基因治疗提供新的靶点.

Keywords: c-myc; 反义寡核苷酸; 反义治疗; HT-29细胞; 大肠癌