基础研究
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世界华人消化杂志. 2009-10-18; 17(29): 2972-2977
Published online 2009-10-18. doi: 10.11569/wcjd.v17.i29.2972
PTD-HBcAg融合蛋白诱导特异性CTL抑制转基因小鼠HBV复制
陈小华, 潘庆春, 汤正好, 余永胜, 臧国庆
陈小华, 潘庆春, 汤正好, 余永胜, 臧国庆, 上海交通大学附属上海市第六人民医院感染病科 上海市 200233
陈小华, 博士, 从事病毒性肝炎免疫机制的研究.
基金项目: 国家自然科学基金资助项目, No. 30571669.
作者贡献分布: 此课题由臧国庆设计; 研究过程由陈小华与潘庆春完成; 数据分析由汤正好与余永胜完成; 本论文写作由陈小华与臧国庆完成.
通讯作者: 臧国庆, 教授, 博士生导师, 200233, 上海市宜山路600号, 上海交通大学附属上海市第六人民医院感染病科.zangguoqin@126.com
电话: 021-64369181-8673
收稿日期: 2009-08-07
修回日期: 2009-09-16
接受日期: 2009-09-28
在线出版日期: 2009-10-18
Abstract

目的: 探讨经PTD-HBcAg融合蛋白体内诱导的特异性细胞毒T淋巴细胞(CTL)对HBV转基因小鼠病毒的抑制作用.

方法: 20只HBV转基因小鼠随机分组, 融合蛋白PTD-HBcAg及对照蛋白HBcAg经皮下免疫小鼠, 每周1次, 共3次. 流式细胞仪检测脾细胞中胞内细胞因子水平; 微粒子酶免疫分析法(MEIA)检测血清中乙型肝炎表面抗原(HBsAg)水平; 荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测HBV DNA水平; 肝脏HE染色及免疫组织化学方法检测HBsAg表达.

结果: PTD-HBcAg融合蛋白免疫转基因小鼠后, 能有效上调特异性CTL数量, 肝组织中炎性细胞的数量明显增多, 同时对小鼠血清中HBsAg及HBV DNA水平有明显的抑制作用. 肝组织HBsAg免疫组织化学蛋白平均吸光度分析显示, 50 µg和100 µg PTD-HBcAg融合蛋白组中平均吸光度值与空白组和50 µg HBcAg组相比明显降低(127.77±4.92, 117.71±5.18 vs 156.84±4.94, 138.70±5.92, 均P<0.05), 且组间比较差异有统计学意义.

结论: PTD-HBcAg融合蛋白免疫HBV转基因小鼠后能增加特异性CTL数量, 显著降低血清中HBsAg及HBV DNA水平, 同时抑制肝脏中HBsAg的表达, 在HBV免疫治疗中具有抗病毒作用.

Keywords: 蛋白转导域-乙肝病毒核心抗原; 特异性细胞毒性T淋巴细胞; 乙型肝炎病毒; 转基因小鼠