Copyright
©The Author(s) 2009. Published by Baishideng Publishing Group Inc. All rights reserved.
世界华人消化杂志. 2009-09-28; 17(27): 2762-2766
Published online 2009-09-28. doi: 10.11569/wcjd.v17.i27.2762
Published online 2009-09-28. doi: 10.11569/wcjd.v17.i27.2762
RNA干扰HIF-1α对食管癌细胞株TE13的生物学特性的影响
金海林, 施瑞华, 朱宏, 凌亭生, 郝波, 南京医科大学第一附属医院消化科 江苏省南京市 210029
金海林, 南京医科大学第一附属医院硕士在读研究生, 主要从事消化系肿瘤早期发病机制研究.
作者贡献分布: 该课题由金海林、施瑞华及朱宏共同设计; 研究过程由金海林与郝波在施瑞华指导下完成; 所用试剂及分析工具由施瑞华提供; 数据分析由金海林、凌亭生及郝波完成; 论文写作由金海林与施瑞华完成.
通讯作者: 施瑞华, 教授, 210029, 江苏省南京市广州路300号, 南京医科大学第一附属医院消化科. ruihuashi@126.com
电话: 025-83718836-6973
收稿日期: 2009-07-28
修回日期: 2009-09-11
接受日期: 2009-09-15
在线出版日期: 2009-09-28
修回日期: 2009-09-11
接受日期: 2009-09-15
在线出版日期: 2009-09-28
Abstract
目的: 探讨HIF-1α沉默后对食管癌细胞株TE13的生物学行为的影响.
方法: 应用倒置荧光显微镜观察HIF-1α的干扰质粒转染食管癌细胞TE13后绿色荧光蛋白的表达; 采用Western blot方法检测HIF-1α蛋白的表达; 四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测转染前后细胞增殖能力的变化; Transwell方法检测干扰前后细胞迁移能力的变化; 流式细胞术检测干扰前后细胞周期的变化.
结果: TE13/12单克隆干扰效果好, Western blot结果显示无HIF-1α表达. HIF-1α被干扰后, 细胞增殖能力明显减弱(P<0.05), 运动迁移能力显著下降, 与未转染的细胞相比穿过人工基底膜的细胞数明显减少(18.2±3.7 vs 103.8±8.5,P<0.05). 与未转染组相比, TE13/12的细胞周期发生变化, G2/M期细胞明显减少(5.99%±1.19% vs 20.47%±4.30%, P<0.05), S期增加(64.67%±1.98% vs 48.53%±3.89%, P<0.05).
结论: RNA干扰可引起TE13中HIF-1α的沉默, 而HIF-1α表达下调后食管癌细胞株TE13的增殖与迁移能力均减弱. 推测阻断HIF-1α通路有可能成为治疗人食管鳞癌的新靶点.
Keywords: 食管鳞癌; 缺氧诱导因子-1α; RNA干扰