基础研究
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世界华人消化杂志. 2009-09-08; 17(25): 2555-2560
Published online 2009-09-08. doi: 10.11569/wcjd.v17.i25.2555
γ-氨基丁酸B受体在CCl4诱导肝纤维化大鼠中的表达
樊文梅, 石炳毅, 马锡慧, 魏红山, 黎立, 韩永, 何秀云
樊文梅, 石炳毅, 马锡慧, 韩永, 何秀云, 中国人民解放军第309医院全军器官移植中心移植研究室 北京市 100091
魏红山, 北京地坛医院传染病研究所 北京市 100015
黎立, 中国人民解放军第309医院实验动物中心 北京市 100091
樊文梅, 2004年北京大学医学部博士, 助理研究员, 主要从事肝病发病机制的研究.
基金项目: 国家自然科学基金资助项目, No. 30800509.
作者贡献分布: 此课题由樊文梅、石炳毅及魏红山设计; 研究过程由樊文梅、马锡慧、黎立及韩永操作完成; 研究所用试剂由樊文梅与何秀云提供; 数据分析由樊文梅完成; 论文写作由樊文梅完成.
通讯作者: 石炳毅, 教授, 100091, 北京市海淀区黑山扈路甲17号, 中国人民解放军第309医院器官移植中心. shibingyi@medmail.com.cn
电话: 010-66775188 传真: 010-66775188
收稿日期: 2009-06-05
修回日期: 2009-07-28
接受日期: 2009-08-03
在线出版日期: 2009-09-08
Abstract

目的: 探讨γ-氨基丁酸(GABA)B受体在肝纤维化大鼠中的表达.

方法: SD大鼠, 腹腔注射50% CCl4制备大鼠肝纤维化模型. 从第6周开始, 每周1次取大鼠肝组织, 得到不同肝纤维化程度的肝脏标本. 一部分标本40 g/L甲醛固定, 常规石蜡包埋, 连续4 μm切片, 做组织病理学染色(HE、Masson)和免疫组织化学(α-SMA), 以确定不同肝纤维化水平. 另一部分标本-80℃保存用于提取肝脏RNA, 逆转录得到cDNA, 设计GABA(B)受体、α-SMA、TGF-β、胶原Ⅰ、胶原Ⅲ的引物, 做实时荧光定量PCR, 分析GABA(B)受体的表达与大鼠肝纤维化程度的相关性.

结果: 建模7 wk时, α-SMA、TGF-β、胶原Ⅰ和胶原Ⅲ较6 wk分别增加19.2倍、2.1倍、37.5倍和183.5倍. GABA(B)受体基因表达也明显升高, 升高量达到116.2倍. 6 wk对照组GABA(B)受体基因表达是模型组的2倍. 到12 wk初步形成假小叶时, 只有α-SMA和胶原Ⅰ增加显著, 分别为21.6倍和20.1倍. TGF-β和胶原Ⅲ变化不明显. 其他时间点基因表达与6 wk模型相比无明显变化.

结论: GABA(B)受体可能参与了肝纤维化的发生. 在肝纤维化晚期, 细胞外基质的合成主要以胶原Ⅰ为主, 胶原Ⅲ次之. α-SMA的表达与肝纤维化水平呈正相关.

Keywords: γ-氨基丁酸B受体; 肝纤维化; α-平滑肌动蛋白; 转化生长因子-β