基础研究
Copyright ©The Author(s) 2009. Published by Baishideng Publishing Group Inc. All rights reserved.
世界华人消化杂志. 2009-05-28; 17(15): 1498-1503
Published online 2009-05-28. doi: 10.11569/wcjd.v17.i15.1498
HSV-TK+GFP/GCV自杀基因系统对小鼠胰腺癌的治疗作用
刘为青, 杨军, 董坚
刘为青, 董坚, 昆明医学院第一附属医院生物治疗科 云南省昆明市 650032
杨军, 昆明医学院第一附属医院肿瘤治疗中心 云南省昆明市 650032
刘为青, 主要从事肿瘤生物治疗的研究.
作者贡献分布: 刘为青、杨军及董坚对此文所作贡献均等; 此课题由董坚设计; 研究过程由刘为青与杨军操作完成; 数据分析由刘为青、杨军及董坚完成; 本论文写作由刘为青、杨军及董坚共同完成.
通讯作者: 董坚, 教授, 650032, 云南省昆明市西昌路295号, 昆明医学院第一附属医院生物治疗科. dongjian18@yahoo.com
电话: 0871-5361621 传真: 0871-5361621
收稿日期: 2009-01-28
修回日期: 2009-03-14
接受日期: 2009-03-16
在线出版日期: 2009-05-28
Abstract

目的: 探讨HSV-TK+GFP/GCV自杀基因系统对小鼠胰腺癌细胞系MPC体外及体内杀伤作用及其产生的旁观者效应. 

方法: 通过RT-PCR从基因组文库中扩增出HSV-TK基因全长CDS序列, 并将其与GFP基因定向克隆到质粒表达载体pcDNA3.1(+), 构建重组质粒pcDNA3.1+/HSV-TK+GFP. 脂质体法将重组质粒转染小鼠胰腺癌细胞株MPC细胞, 得到带有HSV-TK和GFP基因的MPC/HSV-TK+GFP细胞, 并将其分别用于体外和体内实验. 

结果: 重组质粒pcDNA3.1+/HSV-TK+GFP导入小鼠胰腺癌细胞株MPC细胞. 体外实验结果显示, 当MPC/HSV-TK+GFP细胞数占混合细胞10%时, 低浓度(20 mg/L)的GCV就可将50%左右的肿瘤细胞杀死. 体内实验结果显示GCV可明显抑制MPC /HSV-TK+GFP细胞在昆明小鼠体内的肿瘤形成.

结论: HSV-TK和GFP基因转入小鼠胰腺癌细胞株MPC细胞并获得稳定表达, HSV-TK+GFP/GCV自杀基因系统在体内外对小鼠胰腺癌均有杀伤作用, 且存在明显的旁观者效应.

Keywords: 自杀基因治疗系统; 旁观者效应; 胰腺癌; 小鼠