基础研究
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世界华人消化杂志. 2008-01-28; 16(3): 240-245
Published online 2008-01-28. doi: 10.11569/wcjd.v16.i3.240
反义c-myc寡核苷酸对转染FHIT基因胃癌细胞MKN28的影响
刘晓宇, 郭淦华, 段晓明, 陈建, 曹建国, 贺修胜
刘晓宇, 郭淦华, 南华大学2005级内科学研究生 湖南省衡阳市 421001
段晓明, 长沙市中心医院 湖南省长沙市 411001
陈建, 南通市第三人民医院消化内科 江苏省南通市 226006
曹建国, 贺修胜, 南华大学肿瘤研究所 湖南省衡阳市 421001
刘晓宇, 南华大学2005级内科学消化专业硕士研究生.
作者贡献分布: 刘晓宇及段晓明对此文所作贡献均等, 此课题由段晓明, 刘晓宇及陈建设计; 研究过程由刘晓宇, 郭淦华及陈建操作完成; 研究所用试剂及分析工具由段晓明, 曹建国及贺修胜提供; 数据分析由刘晓宇及陈建完成; 本论文写作由刘晓宇完成.
通讯作者: 段晓明, 411001, 湖南省长沙市中心医院院长办公室. xiaomingduan@21cn.com
电话: 0731-5667797
收稿日期: 2007-09-08
修回日期: 2008-01-10
接受日期: 2008-01-15
在线出版日期: 2008-01-28
Abstract

目的: 探讨脂质体介导的c-myc反义寡核苷酸对导入脆性组氨酸三联体(FHIT)基因的胃癌细胞增殖及凋亡的影响.  

方法:  通过脂质体将重组FHIT基因PRC/CMV质粒和空载体转染到人类胃癌细胞系MKN28, 并分别转染c-myc反义寡核苷酸, RT-PCR和Westen blot法检测FHIT基因的转染, Western blot法检测细胞c-myc的表达, MTT法分析细胞增殖, AO/EB染色法和流式细胞分析技术检测细胞凋亡.

结果: 转染FHIT基因后, MKN28细胞检测到FHIT基因片段和FHIT蛋白, 而未转染的细胞及转染空载体的细胞未检测到FHIT基因片段及FHIT蛋白. 转染c-myc反义寡核苷酸后, 对MKN28细胞c-myc的表达有明显的抑制作用, 并呈明显的时间依赖性; c-myc asODN对FHIT+ MKN28细胞抑制率(F = 177.480, P<0.05), 凋亡率(F = 41.500, P<0.05)和凋亡比例明显高于FHIT- MKN28细胞.

结论:  癌基因c-myc的表达抑制联合FHIT基因的表达可以发挥较强的抗肿瘤细胞作用, 为多基因治疗肿瘤提供了理论基础.

Keywords: 脆性组氨酸三联体; 反义c-myc寡核苷酸; 转染; 凋亡; 逆转录聚合酶链式反应