Copyright
©The Author(s) 2008. Published by Baishideng Publishing Group Inc. All rights reserved.
世界华人消化杂志. 2008-09-28; 16(27): 3043-3049
Published online 2008-09-28. doi: 10.11569/wcjd.v16.i27.3043
Published online 2008-09-28. doi: 10.11569/wcjd.v16.i27.3043
丙咪嗪对结肠癌HT-29细胞增殖、凋亡的影响及其机制
丁祥武, 高山, 王玮, 襄樊市中心医院消化科 湖北省襄樊市 441021
丁祥武, 严娟娟, 罗和生, 武汉大学人民医院消化科 湖北省武汉市 430060
丁祥武, 医学博士, 主要离子通道与胃肠道恶性肿瘤的相关研究.
基金项目: 湖北省科技攻关计划资助项目, No. 2007AA402C66.
作者贡献分布: 丁祥武对本文作主要贡献; 此课题由丁祥武和罗和生设计; 研究过程由丁祥武, 高山, 王玮及严娟娟操作完成; 数据分析由丁祥武和罗和生完成; 本论文写作由丁祥武完成.
通讯作者: 罗和生, 430060, 湖北省武汉市, 武汉大学人民医院消化科. xdong1971@163.com
电话: 027-88041919-2243
收稿日期: 2008-03-28
修回日期: 2008-07-15
接受日期: 2008-08-12
在线出版日期: 2008-09-28
修回日期: 2008-07-15
接受日期: 2008-08-12
在线出版日期: 2008-09-28
Abstract
目的: 探讨丙咪嗪对结肠癌HT-29细胞的增殖、细胞周期和凋亡的影响及其作用机制.
方法: 按ACTT方法常规培养HT-29细胞, 并以不同浓度(0、1、5、10、25、50和100 μmol/L)丙咪嗪干预, MTT法检测各浓度干预24、48和72 h后的细胞增殖能力; 丙咪嗪以各浓度(0、1、10、50和100 μmol/L)干预HT-29细胞24 h, PI染色后流式细胞仪检测细胞周期分布, Annexin V/PI双染后流式细胞仪和DNA片段梯试验检测细胞凋亡, Western blot检测Eag1蛋白的变化, 逆转录PCR检测p21、p27、CyclinE1和CDK2 mRNA表达水平的变化.
结果: 各浓度丙咪嗪干预HT-29细胞24、48和72 h后, IC50分别为43、32、22 μmol/L; 丙咪嗪以剂量依赖方式诱导HT-29细胞在细胞周期G0/G1期停滞, 随丙咪嗪干预的浓度增加, HT-29细胞的凋亡指数逐渐升高(P<0.01), HT-29细胞中Eag1蛋白的表达水平逐渐下降(P<0.05), p27和p21 mRNA表达水平逐渐增强(P<0.05), CyclinE1和CDK2 mRNA的表达水平逐渐减弱(P<0.05).
结论: 丙咪嗪可抑制HT-29细胞增殖, 阻滞HT-29细胞周期进展, 诱导细胞凋亡. 其作用机制可能与抑制Eag1钾通道的活性, 上调p27和p21表达、下调CyclinE1和CDK2表达有关.
Keywords: 结肠癌; Ether à go-go钾通道; 丙咪嗪; 凋亡; 细胞周期