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世界华人消化杂志. 2008-04-18; 16(11): 1151-1156
Published online 2008-04-18. doi: 10.11569/wcjd.v16.i11.1151
Published online 2008-04-18. doi: 10.11569/wcjd.v16.i11.1151
土槿皮乙酸对BEL-7402细胞凋亡、线粒体膜电位及COX-2蛋白表达的影响
鞠晓华, 徐永红, 李岩, 中国医科大学附属盛京医院消化内科 辽宁省沈阳市 110004
鞠晓华, 2005年中国医科大学博士, 主要从事中药对消化系肿瘤治疗作用的研究.
基金项目: 辽宁省教育厅攻关计划资助项目, No. 2004D186.
作者贡献分布: 此课题由鞠晓华及李岩设计; 研究过程由鞠晓华及徐永红操作完成; 研究所用新试剂及分析工具由鞠晓华及徐永红提供; 数据分析由鞠晓华及徐永红完成; 本论文写作由鞠晓华完成.
通讯作者: 李岩, 110004, 辽宁省沈阳市和平区三好街36号, 中国医科大学附属盛京医院消化内科. yanli0227@126.com
电话: 024-83955189
收稿日期: 2008-01-12
修回日期: 2008-02-28
接受日期: 2008-04-11
在线出版日期: 2008-04-18
修回日期: 2008-02-28
接受日期: 2008-04-11
在线出版日期: 2008-04-18
Abstract
目的: 探讨土槿皮乙酸(PAB)对人肝癌细胞株BEL-7402增殖和凋亡的影响及其影响机制.
方法: 体外培养肝癌BEL-7402细胞, 用不同浓度PAB作用不同时间后, MTT比色法检测PAB对细胞增殖的影响; 流式细胞仪分析PAB对细胞周期和凋亡的影响; 吖啶橙染色荧光显微镜下观察PAB引起的肝癌细胞株BEL-7402形态学变化; JC-1检测线粒体膜电位的变化; Western blot方法检测PAB对COX-2表达的影响.
结果: PAB作用细胞24, 48, 72 h, 细胞增殖受到抑制, 且表现为剂量依赖性和时间依赖性; PAB使肝癌细胞细胞周期阻滞于G2/M期; 与对照组相比, 2.0, 4.0 μmol/L PAB作用24 h后, 细胞凋亡率明显增加, 差异显著(19.06%±3.87%, 31.19%±1.46% vs 0.10%±0.08%, P<0.05); 吖啶橙染色发现1.0 μmol/L PAB作用24 h, 细胞内即有凋亡小体出现; 与对照组相比, 0.5 μmol/L PAB作用24 h即可降低BEL-7402线粒体膜电位(P<0.05); 不同浓度PAB作用24 h后, 随PAB浓度增加COX-2蛋白表达递减.
结论: PAB通过降低BEL-7402线粒体膜电位、减少COX-2的表达抑制细胞生长, 诱导细胞凋亡.
Keywords: 土槿皮乙酸; 细胞凋亡; 线粒体膜电位; 环氧化酶; MTT比色法; 流式细胞术; 免疫印迹