基础研究
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世界华人消化杂志. 2008-04-08; 16(10): 1031-1036
Published online 2008-04-08. doi: 10.11569/wcjd.v16.i10.1031
脂肪变性对肝细胞胆固醇代谢的影响
田艳, 范竹萍, 邱德凯, 丁佳, 刘俊平, 高艳敏
田艳, 范竹萍, 邱德凯, 丁佳, 刘俊平, 高艳敏, 上海交通大学医学院附属仁济医院消化内科 上海市消化疾病研究所 上海市 200001
田艳, 2005年上海交通大学医学院消化内科硕士, 主要从事非酒精性脂肪肝的临床与实验研究.
作者贡献分布: 田艳对此文做出主要贡献; 此课题由范竹萍, 田艳, 邱德凯设计; 研究过程由田艳, 刘俊平, 高艳敏操作完成; 研究所用新试剂及分析工具由田艳完成; 数据分析由丁佳, 刘俊平, 高艳敏完成; 本论文写作由田艳及范竹萍完成.
通讯作者: 范竹萍, 200001, 上海交通大学医学院附属仁济医院消化内科, 上海市消化疾病研究所. zhuping_fan@163.com
电话: 021-53882001
收稿日期: 2007-11-05
修回日期: 2008-03-05
接受日期: 2008-03-28
在线出版日期: 2008-04-08
Abstract

目的: 探讨非酒精性脂肪性肝病中肝细胞胆固醇(TC)代谢的相关变化.

方法: 正常成人肝细胞株HL-02, 以油酸软脂酸诱导肝细胞产生脂肪变性, 建立肝细胞脂肪变性模型. 分别于实验12、24、48 h收集细胞, 同期设不含脂肪酸培养的细胞作对照. 油红O染色观察细胞内脂滴变化; 试剂盒检测细胞内三酯酰甘油(TG)和TC含量的变化情况, RT-PCR分别检测表达固醇调节元件结合蛋白2(SREBP-2), 其靶基因羟甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶(HMGCR)、低密度脂蛋白受体(LDLR)及TC 7a羟化酶(CYP7a1)的基因mRNA变化.

结果: 油酸软脂酸诱导12 h即可产生肝细胞脂肪变性, 24 h及48 h脂肪变性逐渐加重. 随造模时间延长, 模型组细胞内TG、TC含量逐渐增多, 且均显著高于对照组(TG: 16.93±1.57 mg/g, 23.67±2.4 mg/g, 51.1±11.76 mg/g vs 8.43±5.65 mg/g; TC: 14.9±0.6, 23.7±1.1 mg/g, 38.4±4.5 mg/g vs 8.5±1.6 mg/g; 均P<0.01); SREBP-2, HMGCR mRNA表达逐渐升高(SREBP-2 mRNA: 1.2972±0.16, 1.6141±0.21, 2.0368±0.27 vs 1.0±0.11; HMGCR mRNA: 1.0311±0.15, 1.2706±0.28, 1.3954±0.32 vs 1.0±0.12; 均P<0.05), 而LDLR、CYP7α1 mRNA表达逐渐下降(LDLR mRNA: 0.8901±0.22, 0.7846±0.18, 0.6912±0.09 vs 1.0±0.24; CYP7α1 mRNA: 0.9726±0.27, 0.6707±0.18, 0.5659±0.16 vs 1.0±0.19; 均P<0.05).

结论: 肝细胞脂变后细胞内TC含量增加, 其合成基因表达升高及代谢基因表达降低可能是其机制; LDLR mRNA表达降低.

Keywords: 肝细胞脂肪变性; 三酯酰甘油; 胆固醇; 逆转录-聚合酶链反应