基础研究
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世界华人消化杂志. 2007-02-28; 15(6): 568-573
Published online 2007-02-28. doi: 10.11569/wcjd.v15.i6.568
骨髓间充质干细胞向肝细胞的诱导分化
钟晓琳, 李昌平, 胡莲, 万居易
钟晓琳, 李昌平, 泸州医学院附属医院消化科 四川省泸州市 646000
胡莲, 宜宾市第一人民医院消化科 四川省宜宾市 644000
万居易, 泸州医学院附属医院心胸外科 四川省泸州市 646000
钟晓琳, 2003年泸州医学院消化内科硕士, 医师, 主要从事肝病研究.
基金项目: 四川省教育厅资助课题, No.2003-A027.
通讯作者: 李昌平, 646000, 四川省泸州市太平街25号, 泸州医学院附属医院消化内科. lichangping1965@sina.com
电话: 0830-2392753
收稿日期: 2006-10-30
修回日期: 2006-11-01
接受日期: 2006-11-28
在线出版日期: 2007-02-28
Abstract

目的: 探索肝细胞生长因子(HGF)、制瘤素M(OSM)在体外诱导骨髓间充质干细胞(MSCs)向肝细胞分化的能力及效果.

方法: 分离、培养大鼠MSCs, 取第3代按以下分组诱导其向肝细胞分化: A组: 低糖杜氏改良培养基(DMEM-LG)+100 mL/L胎牛血清(fetal calf, serum, FCS); B组: 肝细胞生长培养基(HGM); C组: HGM+20 μg/L HGF; D组: HGM+20 μg/L OSM; E组: HGM+20 μg/L HGF+20 μg/L OSM, 于不同时间点用免疫细胞化学检测甲胎蛋白(AFP)、细胞角蛋白18(CK18)表达, 高碘酸-希夫氏(PAS)染色检测糖原表达, 谷氨酰胺脱氢酶法检测上清液尿素含量.

结果: C, E组于诱导第7天出现AFP阳性表达, 以后其阳性表达率随诱导时间延长逐渐降低, 诱导第7天E组阳性表达率高于C组(2 = 6.322, P<0.05). C组、E组分别于诱导第7、14天出现CK18阳性表达, 于诱导第7天开始出现糖原阳性表达, 随诱导时间延长表达率逐渐增高, 同一时间点E组CK18(14 d: 2 = 4.811, P<0.05; 21 d: 2 = 6.902, P<0.01; 28 d: 2 = 5.771, P<0.05)及糖原(14 d: 2 = 6.902, P<0.01; 21 d: 2 = 6.818, P<0.01; 28 d: 2 = 6.818, P<0.01)阳性表达率高于C组. C, E组培养上清液中尿素浓度随诱导时间延长逐渐增高, E组增长幅度比C组高. A, B, D组各时间点均未见AFP、CK18、糖原表达及尿素浓度变化.

结论: MSCs具有向肝细胞分化的能力, HGF能够诱导MSCs分化肝样细胞, OSM与HGF联合使用, 能促进MSCs的分化, 明显提高分化率.

Keywords: 骨髓间充质干细胞; 体外培养; 诱导分化; 肝细胞生长因子; 制瘤素M; 肝细胞