临床研究
Copyright ©The Author(s) 2007. Published by Baishideng Publishing Group Inc. All rights reserved.
世界华人消化杂志. 2007-12-28; 15(36): 3815-3821
Published online 2007-12-28. doi: 10.11569/wcjd.v15.i36.3815
肝癌组织DNA-PKcs过量表达及其靶向siRNA分子的抗增殖作用
余子建, 徐勤枝, 周丽君, 隋建丽, 张士猛, 安静, 王豫, 周平坤
余子建, 南华大学附属第一医院普外科 湖南省衡阳市 421001
徐勤枝, 隋建丽, 张士猛, 安静, 王豫, 周平坤, 军事医学科学院放射与辐射医学研究所放射毒理与肿瘤研究室 北京市 100850
周丽君, 中国人民解放军海军总医院中心实验室 北京市 100037
余子建, 主任医师, 教授, 主要从事临床肝胆外科和实验肿瘤研究.
基金项目: 国家自然科学基金资助项目, No. 30500267, 30672429; 北京市自然科学基金资助项目, No. 7072057; 湖南省卫生厅基金课题资助项目, No. C2005038.
通讯作者: 周平坤, 100850, 北京市, 军事医学科学院放射与辐射医学研究所放射毒理与肿瘤研究室. zhoupk@nic.bmi.ac.cn
电话: 010-66931217
收稿日期: 2007-06-13
修回日期: 2007-11-25
接受日期: 2007-12-22
在线出版日期: 2007-12-28
Abstract

目的: 研究肝癌组织中DNA依赖蛋白激酶催化亚基DNA-PKcs的表达差异及其生物学意义. 

方法: 用组织芯片和免疫组化法检测肝胆癌组织86例, 肝胆管结石切除肝组织17例标本和正常肝组织70例中DNA-PKcs蛋白表达情况, Western blot检测培养细胞中DNA-PKcs表达, Lipofectamine 2000介导DNA-PKcs的siRNA质粒DNA转染, 细胞生长曲线分析细胞增殖, 克隆形成法分析细胞辐射敏感性. 

结果: 组织芯片检测显示, 60例肝癌组织细胞中DNA-PKcs阳性表达率<25%(极低表达), 25%-50%(低表达), 51%-75%(中等表达)和>75%(高表达)分别占15%, 20%, 23.3%和41.7%, 而64例正常肝组织中各DNA-PKcs阳性表达率分别为68.7%, 10.9%, 12.6%和7.8%, 表明癌组织DNA-PKcs的表达水平显著高于正常组织(P = 0.0008). 26例肝癌组织病理切片的免疫组化结果也显示, 其DNA-PKcs表达水平显著高于23例非肿瘤性肝组织(P = 0.001). Western blot检测结果显示, 体外培养的肝癌细胞HepG2, 7721和7402中DNA-PKcs表达水平, 同样显著高于正常肝细胞LO2. siRNA分子靶向抑制DNA-PKcs表达, 不但显著提高HepG2细胞对电离辐射的敏感性, 同时还降低肝癌细胞的增殖速度. 随着DNA-PKcs表达的抑制, 癌基因c-Myc蛋白表达水平也显著降低.

结论: 肝癌组织细胞中DNA-PKcs表达水平显著高于正常肝组织和非肿瘤性肝病理组织, siRNA抑制DNA-PKcs表达, 具有抗癌细胞增殖和放射增敏作用, c-Myc蛋白表达抑制可能是其抗增殖作用的相关机制之一.

Keywords: 肝癌; DNA-PKcs; c-Myc; 组织芯片; 小干扰RNA; 细胞增殖; 放射增敏