基础研究
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世界华人消化杂志. 2007-12-28; 15(36): 3803-3808
Published online 2007-12-28. doi: 10.11569/wcjd.v15.i36.3803
RNA干扰survivin基因靶向治疗大肠癌
张志宏, 韩盛玺, 邱春华, 强欧, 陈和平, 张初民, 李易
张志宏, 韩盛玺, 邱春华, 陈和平, 张初民, 李易, 四川省医学科学院 四川省人民医院消化内科 四川省成都市 610041
强欧, 四川大学华西医院人类多肽研究实验室 四川省成都市 610041
张志宏, 四川省人民医院消化内科主治医生, 主要从事大肠肿瘤的防治方面的研究工作.
通讯作者: 张志宏, 610041, 四川省成都市, 四川省人民医院消化内科. zhang-821@21cn.com
电话: 028-85081923
收稿日期: 2007-05-15
修回日期: 2007-10-23
接受日期: 2007-11-11
在线出版日期: 2007-12-28
Abstract

目的: 通过RNA干扰观察其对suivivin及PTEN在大肠腺癌中表达的差异及对大肠腺癌细胞增殖和凋亡的影响.  

方法: 将survivin siRNA用脂质体2000转染SW620细胞, 以荧光定量PCR仪检测survivin和PTEN mRNA的变化, Western蛋白印迹法半定量检测两者的蛋白变化, 同时用MTT法检测细胞增殖, 流式细胞仪检测细胞的凋亡和细胞周期分布的变化. 

结果: 结肠腺癌SW620中免疫组化染色显示survivin呈阳性表达. siRNA作用于SW620细胞, survivin mRNA及蛋白的表达随着作用时间的延长而下调, PTEN mRNA及蛋白的表达随着作用时间的延长而呈现递增趋势, 在12 h, 24 h, 48 h, survivin mRNA分别下调为对照组的75%, 93.75%, 97.8%, PTEN mRNA较对照组上调41%, 100%, 128%, 均与对照组有显著性差异. MTT法检测siRNA干扰对细胞增殖的影响呈现出时间依赖性, 与对照组相比有显著性差异(P<0.05), 且作用各时间点之间比较亦有显著性差异(P<0.05). 流式细胞仪检测细胞的凋亡率随时间的延长而增加.

结论: survivin siRNA作用于结肠腺癌SW620可使survivin mRNA和蛋白的表达下调, 同时使PTEN的表达上调, 两者呈负相关, 同时抑制细胞的增殖及促进细胞发生凋亡.

Keywords: 生存素; PTEN; RNA干扰; 凋亡; 流式细胞仪