Copyright
©The Author(s) 2007. Published by Baishideng Publishing Group Inc. All rights reserved.
世界华人消化杂志. 2007-11-28; 15(33): 3484-3488
Published online 2007-11-28. doi: 10.11569/wcjd.v15.i33.3484
Published online 2007-11-28. doi: 10.11569/wcjd.v15.i33.3484
RNAi沉默Polo-like kinase-1基因表达对胰腺癌细胞增殖的影响
张尤历, 范钰, 吴莺, 张宇川, 张炜, 江苏大学附属医院消化科 江苏省镇江市 212001
张尤历, 医学博士, 主任医师, 副教授, 主要从事消化系统疾病基础与临床研究.
通讯作者: 范钰, 212001, 江苏省镇江市, 江苏大学附属医院消化科. yufanzh99@sina.com
电话: 0511-85026370 传真: 0511-85026387
收稿日期: 2007-07-14
修回日期: 2007-11-02
接受日期: 2007-11-28
在线出版日期: 2007-11-28
修回日期: 2007-11-02
接受日期: 2007-11-28
在线出版日期: 2007-11-28
Abstract
目的: 探讨polo-like kinase-1(PLK1)基因在胰腺癌细胞中的作用.
方法: 采用PLK1小干扰核糖核酸分子(small interfering RNA, siRNA)转染人胰腺癌Mi-aPaCa-2细胞后, 分别采用实时定量PCR和Western blot检测PLK1基因mRNA和蛋白表达水平, 观察PLK1 siRNA转染对胰腺癌细胞体内外增殖的影响. 于转染不同时间后收集细胞, 分别采用琼脂糖凝胶电泳和TUNEL方法检测胰腺癌细胞凋亡情况.
结果: 胰腺癌MiaPaCa-2细胞经siRNA转染处理后, PLK1 mRNA和蛋白表达水平明显下降(P<0.05). PLK1基因siRNA可明显抑制癌细胞体外生长(P<0.05)和体内裸鼠模型增殖(P<0.05). 细胞凋亡检测发现, DNA电泳出现明显的梯度图谱, 且与浓度相关(r = 0.836, P<0.05). TUNEL结果显示, 转染组癌细胞凋亡指数明显增加, 且呈时间和浓度依赖性(r = 0.875, P<0.05).
结论: PLK1 siRNA转染可明显抑制胰腺癌细胞增殖, 其机制可能与诱导细胞凋亡有关.
Keywords: 胰腺肿瘤; PLK1; RNA干扰; 小干扰RNA; 增殖; 凋亡; 实时定量PCR; 免疫印迹