基础研究
Copyright ©The Author(s) 2007. Published by Baishideng Publishing Group Inc. All rights reserved.
世界华人消化杂志. 2007-07-18; 15(20): 2181-2185
Published online 2007-07-18. doi: 10.11569/wcjd.v15.i20.2181
大鼠酒精性肝病细胞凋亡与细胞色素P4502E1和氧化应激的关系
金武丕, 权修权, 孟繁平, 崔香丹, 朴海今
金武丕, 权修权, 崔香丹, 朴海今, 延边大学医院 吉林省延吉市 133000
孟繁平, 延边大学医学院 吉林省延吉市 133000
金武丕, 博士在读, 主任医师, 主要从事酒精性肝病的研究.
通讯作者: 金武丕, 133000, 吉林省延吉市, 延边大学医院急诊科. wpjin8933@163.com
电话: 0433-2660120
收稿日期: 2007-03-19
修回日期: 2007-04-01
接受日期: 2007-04-13
在线出版日期: 2007-07-18
Abstract

目的: 观察大鼠酒精性肝病组织病理形态学改变, 探讨细胞凋亡与细胞色素P4502E1的表达以及和氧化应激的关系.

方法: 用酒精灌胃法制备酒精性肝病大鼠模型, 模型组给予酒精8 g/kg, 每天分2次灌胃连续8 wk, 对照组给予等量的生理盐水灌胃. 实验8 wk末, 观察肝组织的病理形态学改变, 用原位末端标记法(TUNEL)检测肝细胞凋亡, 用免疫组化法检测肝组织中Caspase-3蛋白表达, 用全自动生化仪检测ALT和AST的含量, 用PCR法测定肝细胞色素P4502E1的基因表达, 分别用硫代巴比妥酸法(TBA法)和黄嘌呤氧化酶法测定肝组织丙二醛(MDA)的含量和超氧化物歧化酶(SOD)的活力.

结果: 模型组凋亡的肝细胞明显增多, 主要分布在中央静脉周围、点状和灶状坏死区; Caspase-3主要分布于中央静脉及肝细胞坏死灶周围细胞的胞质中. 模型组肝细胞凋亡指数(AI)和Caspase-3蛋白表达强度明显高于对照组(AI: 6.2%±1.7% vs 1.7%±0.8%; Caspase-3: 66.7% vs 9.5%, P<0.05, P<0.01). CYP2E1表达: 对照组c1基因频率为91.6%, c2基因频率为8.4%; 模型组c1基因频率为53.4%, c2基因频率为46.6%, 均有显著性差异(P<0.05). 长期酒精摄入大鼠血清MDA含量增加(41.53±7.43 μmol/L vs 15.72±2.06 μmol/L, P<0.05), SOD活力下降(353.12±61.02 kU/L vs 636.82±138.60 kU/L, P<0.05), 与酒精性肝病肝细胞凋亡程度有相关性(r = 0.644, r = -0.511).

结论: 长期酒精摄入可引起大鼠酒精性肝病及及肝功能损伤, 肝细胞凋亡明显增加. CYP2E1基因PstⅠ及RsaⅠRFLPs与酒精性肝病有关, 其中c2基因可能与大鼠酒精性肝病的发生有关. MDA含量和SOD活力在酒精性肝病的肝细胞凋亡过程及脂质过氧化反应中发挥重要作用.

Keywords: 酒精性肝病; 细胞凋亡; Caspase-3; 细胞色素P4502E1; 氧化应激; 原位末端标记法; 免疫组化法; 聚合酶链式反应