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世界华人消化杂志. 2007-07-08; 15(19): 2087-2092
Published online 2007-07-08. doi: 10.11569/wcjd.v15.i19.2087
Published online 2007-07-08. doi: 10.11569/wcjd.v15.i19.2087
中药淫羊藿苷逆转肝癌HepG2.2.15细胞恶性表型及诱导分化研究
王谦, 张玲, 毛海婷, 顾洪涛, 温培娥, 李翠玲, 山东省医学科学院基础医学研究所 山东省医药卫生肿瘤免疫与中药免疫重点实验室 山东省现代医用药物与技术重点实验室 山东省济南市 250062
杨尚军, 山东省医学科学院药物研究所 山东省济南市 250062
夏武青, 山东省千佛山医院 山东省济南市 250014
王谦, 山东省医学科学院硕士研究生, 主要从事肿瘤免疫方面的研究.
基金项目: 国家自然科学基金项目资助, No. 30540041.
通讯作者: 张玲, 250062, 山东省济南市经十路89号, 山东省医学科学院基础医学研究所免疫室. zhlnln@tom.com
电话: 0531-82919933
收稿日期: 2007-02-02
修回日期: 2007-03-01
接受日期: 2007-03-17
在线出版日期: 2007-07-08
修回日期: 2007-03-01
接受日期: 2007-03-17
在线出版日期: 2007-07-08
Abstract
目的: 探讨淫羊藿苷(ICA)诱导HepG2.2.15细胞分化凋亡的作用机制.
方法: MTT法检测细胞增殖; 流式细胞术(FACS)检测细胞周期分布; RT-PCR方法检测P27基因、FLIP基因mRNA表达水平的变化; AnnexinⅤ-FITC/PI双染法检测ICA处理后HepG2.2.15细胞凋亡的变化; 电化学发光法和速率散射比浊法分别检测ICA处理后HepG2.2.15细胞上清液中甲胎蛋白(AFP)和转铁蛋白(Tf)水平变化.
结果: ICA作用HepG2.2.15细胞增殖呈抑制作用, 具有时间依赖性. ICA处理后, HepG2.2.15细胞周期各时相分布与对照组相比发生变化, G0/G1期升高, S期减小, 与对照组相比有显著性差异(56.26±1.56% vs 49.68±1.34%, 19.95±1.24% vs 28.02±1.03%; P<0.01). ICA分别上调HepG2.2.15细胞P27和下调FLIP基因mRNA的表达水平(0.78 vs 0.27, 0.54 vs 0.90); HepG2.2.15细胞凋亡率增加, AFP下降, Tf水平升高, 与对照组相比均有显著性意义(7.09% vs 0.59%, 156±46 mg/L vs 285±58 mg/L, 152.1±26 mg/L vs 67.1±24 mg/L; P＜0.05).
结论: ICA可能通过升高G0/G1期, 减少S期抑制HepG2.2.15细胞的增殖; 上调P27 mRNA和Tf水平, 下调FLIP mRNA的表达和AFP合成的水平来诱导细胞分化.
Keywords: 淫羊藿苷; HepG2.2.15; P27; 甲胎蛋白; 转铁蛋白; FLIP