基础研究
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世界华人消化杂志. 2007-07-08; 15(19): 2082-2086
Published online 2007-07-08. doi: 10.11569/wcjd.v15.i19.2082
5-Aza-CdR体外诱导胃癌细胞系p16基因去甲基化及表达增强
沈文静, 戴冬秋, 滕玥, 刘洁
沈文静, 戴冬秋, 滕玥, 中国医科大学附属第一医院肿瘤外科 辽宁省沈阳市 110001
刘洁, 中国医科大学实验技术中心二部 辽宁省沈阳市 110001
沈文静, 博士生, 研究方向胃癌、卵巢癌转移分子机制与临床应用.
基金项目: 国家自然科学基金资助项目, No. 30572162, No. 30271477; 教育部高校博士点基金资助项目, No. 20050159001.
通讯作者: 戴冬秋, 110001, 辽宁省沈阳市和平区南京北街155号, 中国医科大学附属第一医院肿瘤外科. daidq63@163.com
电话: 024-83283560
收稿日期: 2007-02-16
修回日期: 2007-05-01
接受日期: 2007-05-16
在线出版日期: 2007-07-08
Abstract

目的: 观察去甲基化制剂--5-Aza-CdR对体外培养的胃癌细胞SGC7901 p16基因启动子区甲基化状态及表达的影响, 探讨胃癌细胞p16基因失活的机制及去甲基化制剂对p16基因表达的调控.

方法: 应用不同浓度的5-Aza-CdR(1×10-7, 5×10-7, 1×10-6, 5×10-6 mol/L)处理体外培养的胃癌细胞SGC7901后, MSP法检测用药前后细胞中p16基因的甲基化状态, RT-PCR及 Western-blot法检测用药前后细胞中p16基因mRNA及蛋白表达的变化.

结果: p16基因在胃癌细胞系SGC7901中启动子区呈异常甲基化状态, 在mRNA及蛋白水平低表达. 经过1×10-7, 5×10-7, 1×10-6, 5×10-6 mol/L 5-Aza-CdR处理后, p16基因启动子区呈去甲基化状态, 各组mRNA及蛋白表达相应的比值分别与处理前的比例为2.21±0.36, 2.01±0.31; 2.82±0.39, 2.22±0.33; 2.98±0.42, 3.15±0.43及3.35±0.55, 3.75±0.61.

结论: 5-Aza-CdR能逆转胃癌细胞p16基因甲基化状态, 调控p16基因表达.

Keywords: 5-Aza-CdR; p16基因; 胃癌; DNA甲基化