基础研究
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世界华人消化杂志. 2007-05-08; 15(13): 1463-1469
Published online 2007-05-08. doi: 10.11569/wcjd.v15.i13.1463
胃电刺激对大鼠海马胃扩张反应神经元及胃动素和nNOS表达的影响
鹿勇, 徐珞, 孙向荣, 魏晓芳, 陆江, 陈建德
鹿勇, 徐珞, 孙向荣, 魏晓芳, 青岛大学医学院病理生理教研室 山东省青岛市 266021
陆江, 青岛市第五人民医院消化内科 山东省青岛市 266000
陈建德, 美国德克萨斯大学医学院
鹿勇, 青岛大学医学院病理生理教研室, 硕士研究生, 研究方向为胃肠疾病的神经内分泌调控.
基金项目: 国家自然科学基金资助项目, No. 30470642和No. 30670780; 青岛市科技局资助项目, No. 05-1-JC-93.
通讯作者: 徐珞, 266021, 山东省青岛市登州路38号, 青岛大学医学院病理生理教研室. xu.luo@163.com
电话: 0532-82991713 传真: 0532-83813986
收稿日期: 2007-01-30
修回日期: 2007-02-04
接受日期: 2007-02-21
在线出版日期: 2007-05-08
Abstract

目的: 观察胃电刺激(GES)对大鼠海马CA1区胃扩张(GD)相关神经元放电活动的影响及脑内一氧化氮合酶(nNOS)和胃动素(MTL)表达的改变, 初步探讨GES的中枢作用机制.

方法: 选用成年Wistar大鼠58只, 采用细胞外记录神经元单位放电方法, 记录海马CA1区神经元自发放电活动, 根据神经元对胃扩张刺激反应的不同, 分为胃扩张兴奋性神经元(GD-E)和胃扩张抑制性神经元(GD-I). 观察3组不同参数的胃电刺激(GES-A, GES-B和GES-C)对CA1区内GD-E和GD-I放电频率的影响: GES-A (6 mA, 0.3 ms, 40 Hz, 2 s-on, 3 s-off)为标准参数; GES-B的串刺激波宽增至3 ms; GES-C的串刺激频率减少至20 Hz, 其他参数均同GES-A. 采用放射免疫法检测胃电刺激对大鼠不同脑区MTL含量的影响; 并采用免疫荧光组织化学染色方法观察胃电刺激2 h对大鼠海马内nNOS免疫阳性神经元的表达.

结果: CA1区记录的87个神经元中有79个神经元(90.8%)对胃扩张刺激(GD, 3-5 mL, 10-30 s)有反应, 其中40个(50.6%)为GD-E神经元, 39个(49.4%)为GD-I神经元. GES-A, -B, -C分别兴奋了62.5%, 100%和62.3%的GD-E神经元, GES-B对GD-E神经元的作用明显强于GES-C (神经元兴奋率GES-B 100% vs GES-C 62.3%, P<0.05). 在GD-I神经元中有63.6%, 85.7%和50%的GD-I神经元分别被GES-A, -B和-C所兴奋, 其中GES-C的兴奋作用较弱(P = 0.041, vs GES-A; P = 0.021, vs GES-B). GES-A刺激胃窦部2 h, 下丘脑(48.93±6.98 fmol/mg vs 96.23±12.93 fmol/mg, P<0.01)、中脑(30.96±4.86 fmol/mg vs 53.17±8.96 fmol/mg, P<0.05)、延脑(46.27±7.83 fmol/mg vs 73.86±9.37 fmol/mg, P<0.05)和海马(32.23±6.51 fmol/mg vs 62.72±10.07 fmol/mg, P<0.05)中MTL免疫反应物(MTL-IR)的含量与假手术对照组相比明显减少, 但脑桥内MTL-IR的含量与假手术对照组相比无显著差异; 且海马CA1区(16.75±0.91 cells/mm2vs 20.46±1.30 cells/mm2, P<0.05)和CA2-3区(14.91±1.17 cells/mm2vs 18.73±1.10 cells/mm2, P<0.05)nNOS免疫阳性神经元表达明显减少.

结论: GES可兴奋海马CA1区内胃扩张反应性神经元, 电刺激作用的强弱与GES刺激的频率和单个电刺激的持续时间有关; 脑内MTL和海马内nNOS可能参与了GES的中枢作用机制.

Keywords: 胃电刺激; 海马; 胃动素; 一氧化氮合酶; 免疫荧光组织化学; 放射免疫; 大鼠