基础研究
Copyright ©The Author(s) 2006. Published by Baishideng Publishing Group Inc. All rights reserved.
世界华人消化杂志. 2006-03-28; 14(9): 869-873
Published online 2006-03-28. doi: 10.11569/wcjd.v14.i9.869
重组蛋白rhTRAIL55-281与GST-rhTRAIL55-281有肝细胞毒性
刘洪波, 范学工, 黄建军, 李宁, 应若素, 彭建平
刘洪波, 范学工, 李宁, 应若素, 彭建平, 中南大学湘雅医院感染病科 湖南省长沙市 410008
黄建军, 中南大学生物科学与技术学院生物化学系 湖南省长沙市 410008
刘洪波, 1992年湖南师大生物系学士, 讲师, 现在中南大学湘雅医院传染科攻读博士, 从事感染与免疫研究.
通讯作者: 范学工, 410008, 湖南省长沙市湘雅路87号, 中南大学湘雅医院感染病科. xgfan@hotmail.com
电话: 0731-4327392
收稿日期: 2006-02-16
修回日期: 2006-02-19
接受日期: 2006-02-21
在线出版日期: 2006-03-28
Abstract

目的: 检测重组蛋白rhTRAIL55-281与GST-rhTRAIL55-281的对肝细胞的毒性, 以确定其是否可以开发为抗肿瘤药物.

方法: 采用胰酶消化与机械分离结合的方法,获取原代成人肝细胞和胎肝细胞. 用Factor-Xa切除重组蛋白GST-rhTRAIL55-281的GST标签获取rhTRAIL55-281蛋白, 然后分别利用rhTRAIL55-281与GST-rhTRAIL55-281干预肝细胞株L-02、原代成人肝细胞、原代胎肝细胞及对照组正常人外周血单个核细胞(PBMC), 最后利用流式细胞仪检测细胞的凋亡率.

结果: 获得的原代成人肝细胞和胎肝细胞细胞活力达95%以上, 无GST标签的rhTRAIL55-281蛋白纯度达到97%; rhTRAIL55-281与GST-rhTRAIL55-281使肝细胞株L-02及原代成人肝细胞、胎肝细胞大量凋亡. 在10 mL/L的浓度下, 48 h后凋亡率分别为79.1%, 72.8%, 42.2%与80.3%, 74.7%, 47.2%, 而对照组正常人PBMC基本不凋亡.

结论: 重组蛋白rhTRAIL55-281与GST-rhTRAIL55-281有肝细胞毒性.

Keywords: 重组蛋白; rhTRAIL55-281; GST-rhTRAIL55-281; 抗肿瘤药物; 肝细胞; 毒性; 细胞凋亡