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建立十二色荧光原位杂交技术鉴定食管癌 KYSE450 细胞系的核型
吴玉鹏, 王学英, 沈阳农业大学生物科技学院 辽宁省沈阳市 110161
杨壹羚, 韩亚玲, 徐昕, 蔡岩, 杨光之, 詹启敏, 吴旻, 王明荣, 中国医学科学院中国协和医科大学肿瘤医院肿瘤研究所、分子肿瘤学国家重点实验室 北京 100021
吴玉鹏, 男, 1978-03-18生, 安徽枞阳人, 汉族, 沈阳农业大学生物科技学院2003级硕士研究生.
基金项目: 国家重点基础研究发展规划基金项目 , No. 2004CB518705 ; 国家自然科学基金资助项目, Nos. 30470969, 30125026 ; 北京市科技计划重大专项 , No. D0905001040331 .
通讯作者: 王明荣, 100021, 北京市朝阳区潘家园南里17号, 中国医学科学院中国协和医科大学肿瘤医院肿瘤研究所分子肿瘤学国家重点实验室. wangmr04@126.com
电话: 010-87788425 传真: 010-87778651
收稿日期: 2006-02-13
修回日期: 2006-02-15
接受日期: 2006-03-09
在线出版日期: 2006-03-18
修回日期: 2006-02-15
接受日期: 2006-03-09
在线出版日期: 2006-03-18
Abstract
目的: 应用12色荧光原位杂交技术(multicolor fluorescence in situ hybridization, M-FISH)鉴定食管癌细胞系KYSE450的染色体畸变.
方法: 采用DOP-PCR(degenerate oligonucleo-tide primer-polymerase chain reaction)法混合标记两组多色painting探针, 先后两次杂交到相同的KYSE450染色体片, 结合反相DAPI显带技术进行核型分析.
结果: 成功地建立了一种重复的12色荧光原位杂交技术, 并鉴定出KYSE450中存在的畸变染色体. 该细胞系共有54条染色体, 只有13, 21和X号染色体是正常的, 其余21条染色体均表现异常. 1, 2, 3, 5, 6, 8, 9, 14, 15, 16和17号染色体部分区带增益, 4和18号染色体部分区带缺失. 7, 11, 12和19号染色体同时存在区带增益和其它部分区带缺失. 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 11, 12, 14, 15, 16, 17, 18和19号染色体显示有易位. 22号染色体丢失1条, 未检测到10, 20, Y染色体成分.
结论: 12色荧光原位杂交可用于鉴定肿瘤中复杂的染色体异常. KYSE450存在较多与原发性食管鳞癌一致的染色体改变.
Keywords: 多色荧光原位杂交; 食管癌细胞系; 核型; 食管癌