基础研究
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世界华人消化杂志. 2006-08-18; 14(23): 2281-2287
Published online 2006-08-18. doi: 10.11569/wcjd.v14.i23.2281
L02细胞在2-乙酰氨基芴处理大鼠肝中的增殖
林沪, 毛青, 王宇明, 蒋业贵, 邓国宏, 蒋黎, 李俊刚, 刘国栋
林沪, 毛青, 王宇明, 蒋业贵, 邓国宏, 蒋黎, 李俊刚, 刘国栋, 中国人民解放军第三军医大学西南医院感染病研究所 重庆市 400038
林沪, 2003年第三军医大学西南医院感染病研究所硕士, 主治医师, 主要从事肝炎发病机制和病毒性肝炎动物模型的研究.
基金项目: 国家自然科基金资助项目, No. 30271173.
通讯作者: 毛青, 400038, 重庆市沙坪坝区高滩岩正街30号, 中国人民解放军第三军医大学西南医院感染病研究所. linhu7018@yahoo.com.cn
电话: 023-65399064 传真: 023-68754475
收稿日期: 2006-05-09
修回日期: 2006-05-27
接受日期: 2006-06-05
在线出版日期: 2006-08-18
Abstract

目的: 应用2-乙酰氨基芴(2-acetaminofluorene, 2-AAF), 研究L02细胞移植到具有正常免疫性的大鼠肝内的存活与增殖情况.

方法: SD大鼠出生前宫内ip正常人L02肝细胞, 诱导胎鼠对L02肝细胞产生免疫耐受, 出生2 wk时分别ip小(1.2 mg/kg)、中(13 mg/kg)、大剂量(30 mg/kg)2-乙酰氨基芴或生理盐水, 隔日行2/3肝切除术, 同时经脾移植DiI染色后的人L02肝细胞, 建立2-AAF/PH肝细胞增殖模型. 采用免疫荧光、RT-PCR、免疫组化、DiI荧光示踪等方法, 在不同时相分别检测人白蛋白、人白蛋白mRNA、增殖细胞核抗原(PCNA)以及在荧光显微镜下观察人L02肝细胞在鼠肝内的分布, 并采用计算机图像分析系统分析不同时相PCNA阳性细胞的数密度和面积密度.

结果: 2-乙酰氨基芴实验组(小、中、大剂量)的各项检测, 均与对照组无明显区别; 于移植后1, 2, 4, 6, 8, 10 wk在荧光显微镜下观察到人L02肝细胞在鼠肝内的动态分布; 移植后2, 4, 6, 8 wk大鼠均检测出人白蛋白及人白蛋白mRNA; 移植后2, 4, 6 wk检测出特异性人增殖细胞核抗原PCNA, 移植后1, 2, 4, 6, 8 wk检测出非特异性PCNA.

结论: 2-AAF/PH模型中, 2-乙酰氨基芴对移植L02细胞无明显增殖作用; L02细胞在2-乙酰氨基芴处理人鼠嵌合肝动物模型中存活10 wk, 产生白蛋白功能持续8 wk.

Keywords: 嵌合肝; L02肝细胞; 动物模型; 移植; 大鼠