基础研究
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世界华人消化杂志. 2006-07-18; 14(20): 1963-1969
Published online 2006-07-18. doi: 10.11569/wcjd.v14.i20.1963
方剂槲芪散及君药槲寄生提取物对人肝癌细胞生长的抑制作用
李霞, 丰平, 文朝阳, 朱淼, 刘树红, 王学江
李霞, 丰平, 刘树红, 王学江, 首都医科大学病理生理学教研室 北京市 100069
文朝阳, 首都医科大学生物化学教研室 北京市 100069
朱淼, 首都医科大学组织与胚胎学教研室 北京市 100069
李霞, 2004年首都医科大学硕士, 主要从事肝癌前病变的细胞分子生物学研究.
基金项目: 北京市中医药科技项目, No. JJ2005-10; 北京市教育委员会科技发展项目, No. M200610025003.
通讯作者: 王学江, 100069, 北京市右安门外西头条10号, 首都医科大学病理生理学教研室. xj-w@163.com
电话: 010-83911434 传真: 010-83911484
收稿日期: 2006-04-03
修回日期: 2006-05-02
接受日期: 2006-05-22
在线出版日期: 2006-07-18
Abstract

目的: 探讨方剂槲芪散(HQS)及其君药槲寄生提取物多糖和总碱对人肝癌细胞SMMC-7721生长的抑制作用及细胞内活性氧(reactive oxygen species, ROS)浓度的影响.

方法: 采用MTT法测定药物槲芪散(0.3125, 0.625, 1.25 g/L), 槲寄生多糖(0.625, 1.25, 2.5, 5 g/L)及槲寄生总碱(3, 6, 12 g/L)作用48, 72及96 h对细胞(密度1×108/L)增殖的体外抑制作用; 利用流式细胞仪分析细胞周期、凋亡; 利用激光共聚焦显微镜测定细胞内活性氧浓度.

结果: MTT结果显示HQS及槲寄生提取物有较好的抑制肿瘤细胞增殖的作用, 呈现出时间-剂量依赖性, 高剂量组除了HQS和槲寄生总碱48 h时间点外, A值均较对照组明显降低(HQS 72 h: 1.022±0.13 vs 1.207±0.04, P<0.01; 96 h: 1.235±0.20 vs1.602±0.05, P<0.01; 槲寄生多糖48 h: 0.570±0.03 vs 0.744±0.01, P<0.01; 72 h: 0.803±0.04 vs 1.207±0.04, P<0.01; 96 h: 0.860±0.13 vs 1.602±0.05, P<0.01; 槲寄生总碱72 h: 0.919±0.14 vs 1.233±0.04, P<0.01; 96 h: 0.701±0.07 vs1.819±0.04, P<0.01). 流式细胞仪检测发现, 与对照组相比, 经药物作用72 h后, 槲寄生多糖及总碱组G1期细胞比例增加(81.0%, 86.9% vs 70.0%, P<0.01), S期(5.9%, 7.4% vs 13.5%, P<0.01)和G2期(13.1%, 5.7% vs 16.4%, P<0.01)比例降低, HQS组G1期细胞比例无明显变化, S期比例降低(1.5% vs 13.5%, P<0.01), G2期比例增加(28.2% vs 16.4%, P<0.01); 三者均使细胞凋亡增加(HQS: 14.8% vs 6.0%, P<0.01; 槲寄生多糖: 11.7% vs 6.0%, P<0.01; 总碱: 6.7% vs 6.0%, P<0.05). 激光共聚焦显微镜检测发现, 当细胞内荧光强度呈现不断升高趋势时, 加入3种药物后, 荧光强度瞬间下降, 然后稳定在一低水平, 未见明显波动. 当荧光开始稳定在一基线时, 加入槲寄生总碱, 荧光强度陡然增强后又迅速下降到低水平, 并维持一段时间, 而加入HQS及槲寄生多糖未见此变化.

结论: HQS、槲寄生多糖和总碱均能抑制肝癌细胞增殖并促进凋亡.

Keywords: 槲芪散; 槲寄生提取物; 细胞周期; 细胞凋亡; 活性氧