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5-Aza-CdR 对人结肠癌 Lovo 细胞增殖凋亡及抑癌基因RUNX3 表达的影响
倪志, 刘南植, 张庆, 李秀梅, 洪玮, 华中科技大学同济医学院附属同济医院消化内科 湖北省武汉市 430030
李林芳, 河北医科大学药理教研室 河北省石家庄市 050017
倪志, 男, 1975-07-21生, 浙江省镇海人, 汉族, 2003年华中科技大学同济医学院硕士, 主治医师, 主要从事消化系统疾病临床及基础研究.
通讯作者: 刘南植, 430030, 湖北省武汉市解放大道1095号, 华中科技大学同济医学院附属同济医院消化内科. hknizhi@163.com
电话: 027-83663612
收稿日期: 2005-11-08
修回日期: 2005-11-15
接受日期: 2005-11-24
在线出版日期: 2006-01-18
修回日期: 2005-11-15
接受日期: 2005-11-24
在线出版日期: 2006-01-18
Abstract
目的: 研究抑癌基因RUNX3在人结肠癌细胞中的表达情况, 探讨5-氮-2'-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)对人结肠癌Lovo细胞增殖凋亡及RUNX3表达的影响.
方法: 用特异性甲基转移酶抑制剂5-Aza-CdR 0.4, 4, 40 mmol/L处理人结肠癌细胞株Lovo 3 d, 继续常规培养5 d后, 采用四唑盐(MTT)比色观察细胞经药物处理前后的生长活性, 以半定量RT-PCR检测细胞处理前后抑癌基因RUNX3 mRNA的表达, 应用流式细胞仪进行细胞凋亡率的检测.
结果: 人结肠癌细胞Lovo经处理后, 与对照组比较, 5-Aza-CdR 0.4, 4, 40 mmol/L均能明显抑制肿瘤细胞生长, 随5-Aza-CdR浓度增加, 细胞生长速率下降; 对照组Lovo细胞未见RUNX3 mRNA表达, 经药物处理后的细胞均检出该种mRNA的重新表达, 其mRNA的表达相对量分别为0.46±0.06, 0.71±0.06, 0.84±0.07, 与药物存在剂量依赖性(F = 168.4, P<0.01); 对照组细胞凋亡率为2.92%±0.93%, 5-Aza-CdR 0.4, 4, 40 mmol/L处理后Lovo细胞凋亡率分别为10.95%±2.09%, 17.61%±1.51%, 26.60%±1.89%, 与对照组相比较均有统计学意义(P<0.01), 且凋亡率与5-Aza-CdR剂量呈正相关(F = 145.7, P<0.01)
结论: 在人结肠癌细胞株Lovo中, 基因RUNX3可能因过甲基化而导致转录失活, RUNX3基因重新表达能抑制细胞生长, 并能诱导部分细胞凋亡.
Keywords: RUNX3基因; 甲基化; 5-氮-2'-脱氧胞苷; 结肠癌; 凋亡