基础研究
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世界华人消化杂志. 2005-04-01; 13(7): 871-876
Published online 2005-04-01. doi: 10.11569/wcjd.v13.i7.871
缺血预处理对大鼠移植胰缺血再灌注损伤的保护作用及其与细胞凋亡的相关性
刘小南, 霍婷婷, 王为忠, 陈彩平, 管文贤, 陈冬利
刘小南, 王为忠, 管文贤, 陈冬利, 中国人民解放军第四军医大学西京医院胃肠外科 陕西省西安市 710033
霍婷婷, 中国人民解放军第四军医大学西京医院麻醉科 陕西省西安市 710033
陈彩平, 中国人民解放军第四军医大学西京医院小儿科 陕西西省安市 710033
刘小南, 男, 1972-12生, 陕西省西安市, 主治医师, 讲师, 医学博士, 主要从事器官移植方面的研究.
通讯作者: 刘小南, 710033, 陕西省西安市, 中国人民解放军第四军医大学西京医院胃肠外科. liuxnys@yahoo.com.cn
电话: 029-83375161
收稿日期: 2004-11-29
修回日期: 2005-01-21
接受日期: 2005-01-26
在线出版日期: 2005-04-01
Abstract

目的: 探讨缺血预处理对大鼠移植胰缺血再灌注损伤的早期保护作用及其与细胞凋亡的相关性.

方法: 正常大鼠6只为对照组, 糖尿病SD大鼠24只随机分为缺血再灌注组(I/R组, n = 6)和缺血预处理组(IPC组, n = 18), IPC组又根据不同方法分为3个亚组: IPC1组(缺血5 min再灌注5 min 1次, n = 6)、IPC2组(缺血5 min再灌注5 min 2次, n = 6)和IPC3组(缺血5 min再灌注5 min 3次, n = 6), I/R组和IPC组均行单纯胰腺移植, 24只SD大鼠为供体; 检测各组再灌注前、后血糖; 再灌注后2 h血清中TNF-α和NO的含量、移植胰组织中SOD, MPO和MDA含量; 用TUNEL法观察移植胰组织细胞凋亡情况, Western Blot法检测移植胰组织Bax和Bcl-2蛋白表达情况.

结果: 再灌注后IPC1(14.3±1.1 vs 12.1±0.9 mmol/L, P<0.05)组、IPC2(12.1±0.9 vs 16.5±1.4 mmol/L, P<0.01)和IPC3组(14.7±1.3 vs 12.1±0.9 mmol/L, P<0.05)相对于I/R组血糖低; IPC2组较IPC1组(12.1±0.9 vs 14.3±1.1 mmol/L, P<0.05)和IPC3组(12.1±0.9 vs 14.7±1.3 mmol/L, P<0.05)血糖低. 再灌注后IPC1(1.41±0.17 vs 1.79±0.25 kU/L, P<0.05)组、IPC2(1.05±0.16 vs 1.79±0.25kU/L, P<0.01)和IPC3组(1.43±0.20 vs 1.79±0.25 kU/L, P<0.05)较I/R组血清中TNF-α含量低; IPC2组较IPC1组(1.05±0.16 vs 1.41±0.17 kU/L, P<0.05)和IPC3组(1.05±0.16 vs 1.43±0.20kU/L, P<0.05)TNF-α含量低. 再灌注后IPC1(13.13±2.87 vs 8.91±1.23 μg/L, P<0.05)组、IPC2(18.79±2.39 vs 8.91±1.23 μg/L, P<0.01)和IPC3组(14.36±1.78 vs 8.91±1.23 μg/L, P<0.05)较I/R组血清中NO含量高; IPC2组较IPC1组(18.79±2.39 vs 13.13±1.87 μg/L, P<0.05)和IPC3组(18.79±2.39 vs 14.36±1.78 μg/L, P<0.05)NO含量高. 再灌注后IPC1(179.82±19.54 vs 153.47±17.67 mU/g, P<0.05)组、IPC2(213.64±22.97 vs 153.47±17.67 mU/g, P<0.01)和IPC3组(181.68±20.32 vs 153.47±17.67 mU/g, P<0.05)较I/R组移植胰组织中SOD活性高; IPC2组较IPC1组(213.64±22.97 vs 179.82±19.54 mU/g, P<0.05)和 IPC3组(213.64±22.97 vs 181.68±20.32 mU/g, P<0.05)SOD活性高. 再灌注后IPC1(0.70±0.26 vs 0.87±0.31 mmol/g, P<0.05)组、IPC2(0.46±0.18 vs 0.87±0.31 mmol/g, P<0.01)和IPC3组(0.67±0.15 vs 0.87±0.31 mmol/g, P<0.05)较I/R组移植胰组织中MDA含量低; IPC2组较IPC1组(0.46±0.18 vs 0.70±0.26 mmol/g, P<0.05)和 IPC3组(0.46±0.18 vs 10.67±0.15 mmol/g, P<0.05)MDA含量低. 再灌注后IPC1(0.81±0.23 vs 0.96±0.34 A/g, P<0.05)组、IPC2(0.51±0.16 vs 0.96±0.34 A/g, P<0.01)和IPC3组(0.78±0.22 vs 0.96±0.34 A/g, P<0.05)较I/R组移植胰组织中MPO活性低; IPC2组较IPC1组(0.51±0.16 vs 0.81±0.23 A/g, P<0.05)和IPC3组(0.51±0.16 vs 0.78±0.22 A/g, P<0.05)MPO活性低. 再灌注后IPC1(25.21±3.47 vs 35.65±4.78%, P<0.01)组、IPC2(15.47±2.09 vs 35.65±4.78%, P<0.01)和IPC3组(24.89±3.56 vs 35.65±3.78%, P<0.01)较I/R组移植胰组织中AI值低; IPC2组较IPC1组(15.47±2.09 vs 25.21±3.47%, P<0.05)和 IPC3组(15.47±2.09 vs 24.89±3.56%, P<0.05)AI值低. 再灌注后I/R组胰组织Bax蛋白高表达, Bcl-2蛋白低表达, IPC各组再灌注后移植胰组织Bax蛋白低表达, Bcl-2蛋白高表达, 而IPC2组Bcl-2蛋白表达最高Bax蛋白表达最低.

结论: 缺血预处理对大鼠移植胰的缺血再灌注损伤具有早期保护作用, 可能于提高SOD的活性、增加内源性NO的合成、下调TNF-α和减轻PMNs黏附与聚集有关; 缺血预处理可以减少移植胰缺血再灌注后的细胞凋亡, 可能于减轻PMNs黏附与聚集、减少氧自由基、上调Bcl-2蛋白和下调Bax蛋白有关; 缺血5 min再灌注5 min 2次是最佳的大鼠移植胰缺血预处理诱导办法.

Keywords: 胰腺移植; 缺血预处理; 缺血再灌注; 凋亡; 大鼠