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富含RNA酶组织总RNA提取方法的改良
张传仓, 刘卫鹏, 朱德新, 杜江, 封志纯, 南方医科大学珠江医院儿科 广东省广州市 510282
通讯作者: 封志纯, 510282, 广东省广州市工业大道中253号, 南方医科大学珠江医院儿科. zhjfengzc2000@yahoo.com.cn
电话: 020-61643369 传真: 020-61643369
收稿日期: 2005-01-29
修回日期: 2005-02-21
接受日期: 2005-03-03
在线出版日期: 2005-04-01
修回日期: 2005-02-21
接受日期: 2005-03-03
在线出版日期: 2005-04-01
Abstract
目的: 简化富含RNA酶组织RNA的抽提方法.
方法: 健康SD大鼠10只, 随机分成液氮组及改良组, 每组5只, 用乙醚麻醉后, 分别取胰腺组织约50 mg, 液氮组组织迅速放入液氮中, 改良组组织放入一预装RNAguard 100 μL的1.5 mL EP管中, 放入-70℃冰箱保存. 液氮组将胰腺组织从液氮中取出, 立即放入预装适量液氮的研钵中迅速研磨至粉末(研磨过程中始终保持研钵内有适量液氮), 移入另一1.5 mL EP管中, 加入1 mL Trizol, 按Trizol法提取总RNA; 改良组取眼科剪在酒精灯上消毒后冷却, 从-70℃冰箱中取出冻存的组织, 在冰盒上, 加入1 mL Trizol, 用眼科剪迅速剪切3 min(剪切过程组织不解冻), 剧烈振荡混匀30 s, 以后步骤按Trizol法.
结果: 改良法抽提RNA的效果与液氮研磨法无显著差异(P>0.05), 但方法简单方便.
结论: 改良法提取RNA简单方便, 结果稳定, 值得推广应用.
Keywords: 无