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大蒜素抑制体外人肝癌细胞的侵袭能力
钟宁, 马亚兵, 高海青, 张志勉, 由倍安, 伊永亮, 刘新春, 程 梅, 山东大学齐鲁医院消化内科 山东省济南市 250012
钟宁, 男, 1971-11-7生, 山东省枣庄市人, 汉族, 2002年山东大学博士, 主要从事恶性肿瘤防治研究.
基金项目: 山东省科技发展计划项目, No. 95006.
通讯作者: 高海青, 250012, 山东省济南市文化西路107号, 山东大学齐鲁医院老年病科. ghq1@hotmail.com
电话: 0531-6677788 传真: 0531-6927544
收稿日期: 2004-07-26
修回日期: 2004-08-15
接受日期: 2004-08-25
在线出版日期: 2005-03-15
修回日期: 2004-08-15
接受日期: 2004-08-25
在线出版日期: 2005-03-15
Abstract
目的: 肝癌的侵袭与转移是导致其不良预后的重要因素, 目前临床缺乏针对肝癌侵袭与转移的有效治疗措施. 本研究通过人肝癌细胞培养, 研究大蒜素对体外人肝癌细胞侵袭能力的影响, 并在基因水平上探讨其机制.
方法: 将人肝BEL-7402细胞传代, 取进入指数生长期的细胞随机分为阿霉素组Human (5 mg/L)、大蒜素低、中、高剂量组(25、50、100 mg/L), 另设空白对照. 处理后每30 min观察一次细胞转移相关超微结构, 8 h后用流式细胞术检测肿瘤侵袭转移抑制基因nm23-H1和P21ras表达水平. 数据用SAS 8.2软件进行χ2检验.
结果: 与阿霉素组相比, 大蒜素处理后超微结构除凋亡表现外, 大多数贴壁细胞胞质回缩, 细胞之间的连接减少, 空隙加大, 细胞之间界限变清晰, 表面的丝状微绒毛也明显减少. 流式细胞检测显示, nm23-H1表达的荧光强度空白对照组为19.19, 5 mg/L阿霉素组为119.76, 25 mg/L大蒜素组为84.28, 50 mg/L大蒜素组为92.64, 100 mg/L大蒜素组为138.08, nm23-H1表达与大蒜素呈明显剂量效应关系, 大蒜素高剂量组比阿霉素组显著增强(138.08 vs 119.76, P<0.05). 而P21ras表达的荧光强度在空白对照组、阿霉素组和低、中、高剂量组分别为2.65%、3.56%、1.55%、3.22%、3.44%, 都表现为阴性低表达, 各组间没有明显差别.
结论: 大蒜素可以抑制体外肝癌细胞的侵袭能力, 其机制可能与大蒜素特异性影响BEL-7402细胞表面的微绒毛和上调肿瘤侵袭与转移抑制基因nm23-H1的表达有关.
Keywords: 大蒜素; 肝癌; 肝细胞; 侵袭; nm23-H1