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三羟基异黄酮诱导胃癌原代细胞凋亡的分子机制
周海波, 颜云, 蔡建庭, 杜勤, 陈金明, 浙江大学附属二院消化科 浙江省杭州市 310009
周海波, 男, 1969-11-08生, 山东省蒙阴县人, 2003年山东大学医学博士, 主治医师, 主要从事胃癌的研究
通讯作者: 周海波, 310009, 浙江省杭州市, 浙江大学附属二院消化科. zhouhaibohz@163.com
电话: 0571-87783564
收稿日期: 2004-11-09
修回日期: 2004-11-21
接受日期: 2004-12-08
在线出版日期: 2005-02-15
修回日期: 2004-11-21
接受日期: 2004-12-08
在线出版日期: 2005-02-15
Abstract
目的: 探讨三羟基异黄酮诱导胃癌原代细胞发生凋亡的可能性, 揭示该凋亡发生与基因bcl-2和bax之间的关系.
方法: 在体外实验中, 采用MTT比色法测定三羟基异黄酮对胃癌原代细胞的生长抑制率; 以透射电镜和TUNEL染色法, 定性、定量地研究三羟基异黄酮与胃癌原代细胞凋亡的关系; 通过免疫组织化学法和RT-PCR法检测基因bcl-2和bax的表达.
结果: 三羟基异黄酮对胃癌原代细胞有明显抑制作用,随三羟基异黄酮浓度增加和培养时间的延长而增强; 三羟基异黄酮诱导胃癌原代细胞出现凋亡细胞形态; TUNEL染色法可见, 经三羟基异黄酮处理24, 48, 72, 96 h 后, 胃癌原代细胞凋亡数明显随时间增加(1.25±0.30%→4.97±0.80%, 18.44±1.92%, 35.18±0.35%, 43.93±1.11%, P<0.05). 免疫组织化学发现经三羟基异黄酮处理24, 48, 72, 96 h后, 胃癌原代细胞的Bcl-2蛋白阳性率减少(36.34±0.72%→21.62±0.08%, 10.60±0.49%, 7.21±0.45%, 4.54±0.36%, P<0.01), Bax蛋白阳性率增加(10.73±0.57%→20.63±0.86%, 34.3±0.81%, 45.96±0.42%, 58.61±1.46%, P<0.01).RT-PCR也发现经三羟基异黄酮处理24, 48, 72, 96 h后, 胃癌原代细胞的bcl-2 mRNA条带密度降低, bax mRNA条带密度加强.
结论: 三羟基异黄酮可能通过下调bcl-2的表达和上调bax的表达而诱导胃癌原代细胞发生凋亡.
Keywords: 三羟基异黄酮; 胃癌; 凋亡