大肠癌
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世界华人消化杂志. 2005-01-15; 13(2): 184-188
Published online 2005-01-15. doi: 10.11569/wcjd.v13.i2.184
VEGFR2siRNA腺病毒载体的构建及其对人结肠癌细胞系的影响
黄大伟, 吴开春, 潘阳林, 林涛, 刘长江, 郭长存, 樊代明
黄大伟, 吴开春, 潘阳林, 林涛, 刘长江, 郭长存, 樊代明, 中国人民解放军第四军医大学西京医院消化病研究所 陕西省西安市 710032
黄大伟, 男, 1969-1-15生, 男, 汉族, 山东潍坊人, 主治医师, 第四军医大学西京医院消化病研究所硕士.
基金项目: 全军医药卫生科研基金课题, No. 01Z087.
通讯作者: 吴开春, 710032, 陕西省西安市长乐西路15号, 中国人民解放军第四军医大学西京医院消化病研究所. daweih@fmmu.edu.cn
电话: 029-83375230
收稿日期: 2004-11-01
修回日期: 2004-11-07
接受日期: 2004-11-12
在线出版日期: 2005-01-15
Abstract

目的: 构建血管内皮细胞生长因子受体2(VEGFR2) siRNA腺病毒载体, 并研究其对结肠癌细胞系LOVO VEGFR2表达的影响.

方法: 首先构建含有VEGFR2siRNA的鼠U6载体(mU6-VEGFR2siRNA); 利用HindⅢ与XbaⅠ双酶切将鼠U6载体启动子和VEGFR2siRNA克隆入无启动子穿梭载体promoterless pShuttle vector, 得到pShuttle-mU6pro-VEGFR2siRNA; 将pShuttle-mU6pro-VEGFR2siRNA与腺病毒骨架质粒(pAdeasy-1)在BJ5183细菌中进行同源重组, 得到pAdeasy-mU6pro-VEGFR2siRNA; 利用得到的重组腺病毒感染人结肠癌LOVO细胞系, 观察VEGFR2 siRNA对结肠癌细胞VEGFR2表达的影响. 采用West-blot检测感染前后VEGFR2蛋白表达水平的变化.

结果: 成功构建血管内皮细胞生长因子受体2(VEGFR2) siRNA腺病毒载体, 该载体显著抑制LOVO细胞中VEGFR2的蛋白表达水平(P<0.01).

结论: 构建的Adeasy-mU6pro-VEGFR2siRNA腺病毒能有效地抑制LOVO细胞中VEGFR2表达, 从而为肿瘤的基因治疗打下基础, 也为肿瘤血管抑制治疗提供了新思路.

Keywords: 腺病毒载体; 血管内皮细胞生长因子受体2; LOVO细胞系; 结肠癌