基础研究
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世界华人消化杂志. 2005-06-28; 13(12): 1377-1381
Published online 2005-06-28. doi: 10.11569/wcjd.v13.i12.1377
DNA聚合酶b过表达对食管癌EC9706细胞的影响
赵军, 路静, 宋谦, 崔自由, 赵国强, 黄幼田, 杨洪艳, 赵继敏, 董子明
赵军, 路静, 宋谦, 崔自由, 赵国强, 黄幼田, 杨洪艳, 赵继敏, 董子明, 郑州大学基础医学院病理生理教研室 河南省郑州市 450052
赵军, 女, 1971-07-15生, 山西长治人, 汉族. 2002年郑州大学硕士, 主治医师. 主要从事食管癌病因研究.
基金项目: 国家自然基金资助项目, No. 39870287; 教育部科学技术研究重点项目, No. 02088.
通讯作者: 董子明, 450052, 河南省郑州市大学路40号, 郑州大学基础医学院病理生理教研室. dongzm@zzu.edu.cn
电话: 0371-66974204
收稿日期: 2005-03-06
修回日期: 2005-03-20
接受日期: 2005-04-08
在线出版日期: 2005-06-28
Abstract

目的: 观察过表达的DNA聚合酶b对食管癌EC9706细胞系的影响.

方法: 运用PCR方法, 从质粒pcDNA3.1-polb中扩增出野生型和突变型的DNA聚合酶b基因,作为目的片段, 定向克隆至pEGFP-C3真核绿色荧光蛋白表达载体, 获得野生型和突变型的重组真核表达载体pEGFP-C3-polb.分别将野生型和突变型的pEGFP-C3-polb转染EC9706细胞, 荧光显微镜观察其定位, 绘制生长曲线, 测定细胞周期.

结果: DNA序列分析证实了重组载体中的DNA聚合酶b序列正确, 荧光显微镜结果显示野生型的DNA聚合酶b表达以细胞核为主, 突变型的DNA聚合酶b则表达在整个细胞中, 明显与野生型的DNA聚合酶b的核定位不同.而且, 野生型的细胞生长较对照组缓慢(P<0.05), 野生型的还能抑制EC9706细胞的生长和使S期细胞减少(22.11±0.12 vs 44.86±0.03, P<0.05), 而突变型的则不能促进EC9706细胞的生长, S期细胞增殖不明显(P>0.05).

结论: 过表达的野生型食管癌DNA聚合酶b可以降低EC9706细胞的增殖.

Keywords: DNA聚合酶b; 增强型绿色荧光蛋白; 野生型; 突变