基础研究
Copyright ©The Author(s) 2005. Published by Baishideng Publishing Group Inc. All rights reserved.
世界华人消化杂志. 2005-01-01; 13(1): 31-34
Published online 2005-01-01. doi: 10.11569/wcjd.v13.i1.31
TNFα对HBV体外感染人绒毛膜癌JEGIII细胞的促进作用
李富军, 王雪萍, 徐德忠, 闫永平, 门可, 张景霞
李富军, 兰州军区兰州总医院医务部 甘肃省兰州市 730050
王雪萍, 徐德忠, 闫永平, 门可, 张景霞, 中国人民解放军第四军医大学预防医学系流行病学教研室 陕西省西安市 710033
李富军, 男, 1974-04-28生, 宁夏盐池县人, 汉族, 博士, 主治医师.
基金项目: 国家自然科学基金资助项目, No. 30000181.
通讯作者: 王雪萍, 710033, 陕西省西安市长乐西路169号, 中国人民解放军第四军医大学流行病教研室. wangxp@fmmu.edu.cn
电话: 029-83373456 传真: 029-83374499
收稿日期: 2004-11-09
修回日期: 2004-11-20
接受日期: 2004-11-25
在线出版日期: 2005-01-01
Abstract

目的: 检测TNF-α存在条件下HBV体外感染人绒毛膜癌细胞的情况, 为HBV宫内传播机制的研究提供细胞学基础.

方法: 在TNF-α存在条件下, 绒毛膜癌JEGIII细胞与HBV阳性血清(2×1012 HBV DNA/L)共同孵育. 感染后24 h, 胰酶常规消化细胞, PBS充分洗涤, 直至最后一遍洗液ELISA检测HBsAg阴性, 重新接种细胞, 加新鲜培养液继续培养, 每隔12 h, 收集培养标本, 分别用Western blotting, 免疫细胞化学方法, 透射电镜检测培养物中HBV标志物.

结果: HBV阳性血清感染JEGIII细胞36 h后, 各时间点收集的细胞上清标本中Western blotting均检测到阳性的HBsAg条带, 免疫细胞化学方法检测细胞铺片发现, 在TNF-α存在的感染环境下, HBsAg呈阳性或强阳性表达, 与TNF-α不存在的感染环境下相比有显著性差别(20.40±4016 vs 7.40±1.82, P<0.01), 而且HbsAg主要位于胞膜和/或胞质, 透射电镜下, 细胞扩张的粗面内质网腔内发现有杆状HBsAg颗粒.

结论: HBV体外可以成功感染人绒毛膜癌细胞. 本体外细胞感染模型是深入研究HBV宫内传播机制的关键.

Keywords: 乙型肝炎病毒; 宫内传播; 绒毛膜癌细胞