肝癌
Copyright ©The Author(s) 2004. Published by Baishideng Publishing Group Inc. All rights reserved.
世界华人消化杂志. 2004-09-15; 12(9): 2045-2048
Published online 2004-09-15. doi: 10.11569/wcjd.v12.i9.2045
短发夹RNA抑制外源荧光素酶在肝癌细胞中的表达
胡礼仪, 张有顺, 周新, 戴宗晴, 黄玲, 王菊
胡礼仪, 张有顺, 戴宗晴, 黄玲, 王菊, 郧阳医学院附属东风医院肝脏外科研究所 湖北省十堰市 442008
周新, 武汉大学中南医院检验科 湖北省武汉市 430071
胡礼仪, 男, 1972-09-19生, 四川省筠连县人, 汉族, 1998年重庆医科大学本科毕业, 2002年武汉大学医学院临床检验诊断学专业硕士研究生, 主管技师, 研究方向为肿瘤的基因治疗.
基金项目: 湖北省卫生厅资助项目, No. JX1B116.
通讯作者: 张有顺, 442008, 湖北省十堰市大岭路10号, 郧阳医学院附属东风医院肝脏外科研究所. zlib125@163.com
电话: 0719-8272283
收稿日期: 2004-06-08
修回日期: 2004-06-12
接受日期: 2004-06-17
在线出版日期: 2004-09-15
Abstract

目的: 构建含荧光素酶(luciferase, luc)基因的短发夹状RNA(short hairpin RNA, shRNA)表达质粒, 并观察其在肝癌细胞Bel-7402中抑制外源荧光素酶的表达.

方法: 设计的两条反向重复的多聚核苷酸序列, 退火形成双链DNA, 再与双酶切后的载体PGE-1连接, 构建pshRNA-luc重组质粒, 与荧光素酶基因表达质粒pCMV-luc共转染肝癌细胞株BEL-7402, 检测其对荧光素酶表达的影响.

结果: PCR和DNA序列分析证实了重组质粒构建成功. pshRNA-luc对共转染的pCMV-luc中的荧光素酶具有明显的抑制作用, 抑制率可达86%(P <0.01).

结论: 构建的pshRNA-luc表达质粒能有效地抑制荧光素酶在肝癌细胞中的表达, 为RNA干扰用于肿瘤的基因治疗打下基础.

Keywords: N/A