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大鼠骨髓基质干细胞分化为胰岛样细胞
陈立波, 姜小兵, 杨炼, 华中科技大学协和医院外科 湖北省武汉市 430022
陈立波, 男, 1972-10-15生, 江苏省泗洪县人, 汉族. 1997年同济医科大学七年制硕士毕业, 2000年华中科技大学同济医学院博士毕业, 副教授, 副主任医师. 主要从事肝癌生物学和胰岛细胞移植等的研究.
基金项目: 国家自然科学基金资助项目 , No. 30170911 ; 湖北省科技攻关计划 , No. 2002AA301C26 .
通讯作者: 陈立波, 430022, 湖北省武汉市解放大道1277号, 华中科技大学同济医学院附属协和医院外科. libo_chen@hotmail.com
电话: 027-85726301 传真: 027-85776343
收稿日期: 2003-10-10
修回日期: 2003-11-01
接受日期: 2003-12-08
在线出版日期: 2004-04-15
修回日期: 2003-11-01
接受日期: 2003-12-08
在线出版日期: 2004-04-15
Abstract
目的: 探讨体外自体骨髓基质干细胞(MSC)定向诱导分化为胰岛样细胞的可能性, 为进一步诱导分化胰岛细胞治疗糖尿病奠定实验和理论基础.
方法: 对Wistar大鼠骨髓基质干细胞(MSC)进行体外培养, 通过不同的条件诱导MSC向胰岛样细胞分化: LN组, 10 mmoL/L尼克酰胺＋1 mmoL/L -巯基乙醇的L-DMEM(含20 mL/L FBS)预先诱导24 h, 10 mmoL/L尼克酰胺＋1mmol/L -巯基乙醇的无血清H-DMEM诱导10 h. HN组, 含20 mmoL/L尼克酰胺的L-DMEM (20 mL/L FBS)预先诱导24 h, 20 mmoL/L尼克酰胺的无血清H-DMEM诱导10 h. 诱导细胞形态通过倒置显微镜观察, 并通过免疫细胞化学检测分化细胞表达Insulin 和Nestin. 向3只Streptozotocin(STZ)诱导糖尿病大鼠皮下种植MSC分化胰岛细胞1×107, 1 wk后观察大鼠血糖水平变化.
结果: LN、HN组细胞均可见部分骨髓基质干细胞分化、增生, 形成胰岛样细胞团, 部分细胞向神经元样细胞分化, 对照组细胞未见明显分化. 免疫细胞化学显示Insulin在诱导细胞呈显著表达, Nestin在分化前细胞显著表达. 皮下种植MSC分化胰岛细胞可有效降低STZ糖尿病大鼠的血糖水平.
结论: 体外诱导骨髓基质干细胞定向分化为胰岛样细胞存在可行性, 本实验将可能为临床糖尿病干细胞治疗提供新的途径.
Keywords: N/A