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HCBP6对HCV核心蛋白反式激活作用的影响
成军, 李克, 刘妍, 王琳, 陆荫英, 钟彦伟, 中国人民解放军第302医院传染病研究所基因治疗研究中心、全军病毒性肝炎防治研究重点实验室 北京市 100039
成军, 男, 1963-08-17生, 山东省淄博市人, 汉族. 1994年北京医科大学传染病学博士, 1994-11-17/1997-12-01美国得克萨斯大学健康科学中心临床免疫与传染病科完成博士后研究. 主要学术研究方向是肝炎病毒与肝细胞相互作用的分子生物学机制, 出版专著5部, 发表论文及综述400篇. 现任中华医学会传染病与寄生虫病学分会副主任委员、中华医学会热带病与寄生虫病学分会常委、解放军医学会传染病专业委员会委员, 中华传染病杂志》副主编、《胃肠病学和肝病学杂志》副主编、《热带病与寄生虫病杂志》副主编, 《中华肝脏病杂志》、《World J Gastroenterol》编委等.
基金项目: 国家自然科学基金攻关项目 , No. C03011402, No. C30070689, No. C39970674 ; 军队九、五科技攻关项目 , No. 98D063 ; 军队回国留学人员启动基金项目 , No. 98H038 ; 军队十、五科技攻关青年基金项目 , No. 01Q138 ; 军队十、五科技攻关面上项目 , No. 01MB135 .
通讯作者: 成军, 100039, 北京市西四环中路100号, 中国人民解放军第302医院传染病研究所基因治疗研究中心、全军病毒性肝炎防治研究重点实验室. cj@genetherapy.com.cn
电话: 010-66933392 传真: 010-63801283
收稿日期: 2003-11-13
修回日期: 2003-12-01
接受日期: 2003-12-16
在线出版日期: 2004-04-15
修回日期: 2003-12-01
接受日期: 2003-12-16
在线出版日期: 2004-04-15
Abstract
目的: 研究HCBP6蛋白在细胞内表达时, 是否通过蛋白-蛋白之间的相互作用, 对HCV核心蛋白的反式激活作用产生影响.
方法: 利用常规的分子生物学技术分别构建HCBP6蛋白和丙型肝炎病毒(HCV)核心蛋白的真核表达载体. 酶联免疫黏附法enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)检测CAT的表达水平, 间接测定HCV核心蛋白对于SV40病毒即刻早期启动子的反式激活活性.
结果: 重组表达载体pcDNA3.1(-)-HCBP6、pcDNA3.1(-)-core 经过限制性内切酶作图分析和核苷酸序列分析证实正确无误. 转染HepG2细胞之后, HCV核心蛋白的表达, 对于SV40病毒即刻早期启动子的转录表达活性具有显著的反式激活作用. 但是, 当与HCBP6蛋白的表达载体进行共转染时, SV40病毒的即刻早期启动子的转录活性受到抑制. 重复试验得到了相似的结果. HCBP6蛋白的表达对于HCV反式激活SV40病毒即刻早期启动转录活性的抑制率40.4%-62.3%.
结论: HCBP6蛋白在细胞内的表达对HCV核心蛋白反式激活SV40病毒的即刻早期启动子的转录活性具有显著的抑制作用.
Keywords: N/A