病毒性肝炎
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世界华人消化杂志. 2004-01-15; 12(1): 74-77
Published online 2004-01-15. doi: 10.11569/wcjd.v12.i1.74
乙型肝炎病毒X蛋白反式激活基因5的克隆
王琳, 李克, 成军, 张健, 刘敏
王琳, 李克, 成军, 张健, 刘敏, 中国人民解放军第302医院传染病研究所基因治疗研究中心, 全军病毒性肝炎防治研究重点实验室 北京市 100039
通讯作者: 成军, 100039, 北京市西四环中路100号, 中国人民解放军第302医院传染病研究所基因治疗研究中心, 全军病毒性肝炎防治研究重点实验室. cj@genetherapy.com.cn
电话: 010-66933391 传真: 010-63801283
收稿日期: 2003-06-25
修回日期: 2003-07-01
接受日期: 2003-07-16
在线出版日期: 2004-01-15
Abstract

目的: 为了阐明乙型肝炎病毒(HBV)感染相关疾病的发病机制, 筛选并克隆丙型肝炎病毒非结构蛋白HBx反式激活新型靶基因.

方法: 以HBV X蛋白(HBx)表达质粒pcDNA3.1(-)-X转染HepG2细胞, 以空载体pcDNA3.1(-)为平行对照, 提取mRNA并进行SSH分析. 对于所获基因片段序列分析表明, 其中之一为新型基因片段, 与GenBank中注册的已知功能基因序列没有同源性, 利用表达序列标签(EST)序列的搜索和比对, 确定新型基因序列并命名为XTP5. 从HepG2细胞提取总RNA, 以逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)技术扩增获得该新基因的全长序列.

结果: XTP5基因的编码基因序列全长为1 527个核苷酸(nt), 编码产物由508个氨基酸残基(aa)组成.

结论: HBx是一种由病毒基因组编码的具有反式激活作用的蛋白. 应用SSH技术发现了HBx反式激活作用的新的靶基因, 这一发现, 为阐明HBx蛋白的反式激活作用及其机制, 开辟了新的研究方向.

Keywords: N/A