修回日期: 2003-01-25
接受日期: 2003-02-19
在线出版日期: 2003-09-15
研究联合应用胃泌素拮抗剂和胞嘧啶脱氨酶(CD)的基因治疗对结肠癌细胞的杀伤作用.
脂质体法转染G1CEACDNa至LoVo细胞. 用含1 mmol/L 5-FC或/和1× 10-8 mmol/L CI-988的100 ml/L胎牛血清的RPMI1640培养基培养细胞, 测生长曲线; MTT法测细胞杀伤率; 透射电镜观察细胞的超微结构; 流式细胞仪annexin V和PI双重染色行凋亡相关检查; Balb/c裸鼠背部皮下接种CD+ LoVo细胞, 5-FC (500 mg/kg)腹腔注射或/和CI-988 (10 mg/kg)灌胃处理20 d, 处死裸鼠后肿瘤称重, 病理切片HE染色, 瘤组织透射电镜检查.
用5-FC或/和CI-988处理6d后CD+ LoVo细胞抑制率分别为90 %和50 %, 二者合用于3d和6d抑制率分别为40 %和97 %; MTT法检测联合应用5-FC和CI-988较单用任何一种处理对CD+ LoVo细胞杀伤作用更强, 有统计学差异(0.53±0.05 vs 0.49±0.02, 0.38±0.06, F =29.5536, n=5, P <0.01); 电镜和流式细胞仪分别显示CD/5-FC和CI-988结合处理72 h后细胞有凋亡现象; 用5-FC (500 mg/kg)腹腔注射和CI-988 (10 mg/kg)灌胃处理荷瘤裸鼠均可出现明显的抑瘤作用, 抑瘤率分别为69.4 %和49.5%, 二者合用抑瘤较单用任一种处理更明显, 有统计学意义(0.42±0.12 vs 0.69±0.11, 1.22±0.22, F=33.1 709, n=5, P<0.05), 抑瘤率达81.5 %, 电镜下见瘤组织内有凋亡小体.
联合应用胃泌素拮抗剂CI-988可以提高CD/5-FC对结肠癌细胞的杀伤作用. 凋亡相关过程可能是这种协同作用的原因.