病毒性肝炎
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世界华人消化杂志. 2003-04-15; 11(4): 385-388
Published online 2003-04-15. doi: 10.11569/wcjd.v11.i4.385
酵母双杂交技术筛选Hcbp6结合的肝细胞蛋白编码基因
王琳, 李克, 成军, 陆荫英, 张健, 陈天艳, 洪源, 刘妍, 王刚, 钟彦伟
王琳, 李克, 成军, 陆荫英, 张健, 陈天艳, 洪源, 刘妍, 王刚, 钟彦伟, 中国人民解放军第302医院传染病研究所基因治疗研究中心, 全军病毒性肝炎防治研究重点实验室 北京市 100039
王琳, 女, 实验技师, 主要从事肝炎病毒蛋白结合蛋白和分子生物学调节机制的研究.
通讯作者: 成军, 100039, 北京市丰台路26号, 中国人民解放军第302医院传染病研究所基因治疗研究中心, 全军病毒性肝炎防治研究重点实验室. cj@genetherapy.com.cn
电话: 010-66933392 传真: 010-63801283
收稿日期: 2002-10-29
修回日期: 2002-11-14
接受日期: 2002-11-28
在线出版日期: 2003-04-15
Abstract
目的

Hcbp6是与核心蛋白相结合的未知功能蛋白基因, 为了初步提示他的生物学功能和在细胞中的存在形式, 采用酵母双杂交体系寻找与他相互作用的肝细胞蛋白, 探讨Hcbp6的生物功能.

方法

应用酵母双杂交系统3, 构建Hcbp6诱饵质粒并转化酵母AH109, 与含人肝细胞cDNA文库质粒的酵母Y187进行配合, 在涂有x--gal营养缺陷型培养基(SD/-Trp-Leu-His-Ade)上筛选生长．挑选蓝色克隆, 提取此酵母克隆的质粒, 转化大肠杆菌提取质粒DNA后进行测序, 然后进行生物信息学分析.

结果

筛选出4种与Hcbp6特异性相互作用的蛋白, 包括Paralemmin(PALM)、Ran结合蛋白2(Ranbp2)、跨膜运输蛋白21(Tmp21)和血清白蛋白.

结论

推测该蛋白可能为一分泌性蛋白, 或与分泌蛋白的形成有关, 进一步的生物学功能的研究需要更多的实验加以探讨.

Keywords: N/A