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IFN-γ基因转染抗大肠癌细胞的作用机制
吴文溪, 丁强, 沈历宗, 华一兵, 南京医科大学第一附属医院普外科 江苏省南京市 210029
许德华, 刘新垣, 中国科学院上海生物化学研究所 上海市 200031
吴文溪, 男, 1947-1生, 江苏省无锡人, 汉族, 硕士, 教授, 主任医师.
通讯作者: 吴文溪, 210029, 江苏省南京市, 南京医科大学第一附属医院普外科. wuwenxi@yahoo.com
电话: 025-6619960
收稿日期: 2002-07-01
修回日期: 2002-07-15
接受日期: 2002-07-30
在线出版日期: 2003-03-15
修回日期: 2002-07-15
接受日期: 2002-07-30
在线出版日期: 2003-03-15
Abstract
目的: 通过检测IFN-γ基因转染对大肠癌细胞表面抗原的表达情况、对细胞的生长抑制、细胞周期的影响情况, 初步探讨IFN-γ基因治疗抗肿瘤作用的机制.
方法: 制备含人IFN-γ基因的真核表达质粒pcDNA-3-IFN-γ, 利用阳离子脂质体将其转染进入人大肠癌细胞株LOVO、SW62O、HCT116BG及人宫颈癌细胞株Hela, 检测基因转染后IFN-γ基因的表达情况, 同时检测基因转染对大肠癌细胞CEA、HLA-DR抗原表达的诱导作用和细胞凋亡及细胞周期的变化.
结果: 基因转染后, 原来高表达CEA的细胞株(LOVO、 HCT116BG)其上清中CEA含量增加明显(从21.25±6.76 m/l增加到34.96±7.07 mg/L P<0.05), 而原来低表达甚至不表达CEA的细胞株(Hela、SW620)其上清CEA含量则无明显增加 (P>0.05). 各细胞株表面的HLA-DR的表达量在导入IFN-γ基因后明显增强(平均表达率从3.91%±3.61% 增加到11.67±7.20% P<0.01). 通过对细胞的凋亡情况和细胞周期的变化显示: 转染IFN-γ基因后促进了LOVO细胞的凋亡(各时段平均凋亡率对照组与治疗组分别为8.27±5.62%与15.32±11.41% P<0.05), 细胞的S期比例随作用时间延长而呈逐渐降低趋势, 显示了基因转染后DNA的合成代谢受到抑制.
结论: IFN-γ基因转染后可有效增强大肠癌细胞表面抗原的表达, 诱导机体产生抗肿瘤免疫应答; 并可能通过抑制细胞DNA的合成, 促进细胞的凋亡, 抑制肿瘤细胞的增生等机制发挥抗肿瘤作用.
Keywords: N/A