基础研究
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世界华人消化杂志. 2014-06-28; 22(18): 2525-2531
Published online 2014-06-28. doi: 10.11569/wcjd.v22.i18.2525
bcl6b基因转染对人食管癌细胞生物学行为的影响
胡随, 毛高平, 郭明洲
胡随, 安徽医科大学研究生院 安徽省合肥市 230032
毛高平, 中国人民解放军空军总医院消化内科 北京市 100142
郭明洲, 中国人民解放军总医院消化内科 北京市 100853
胡随, 主要从事消化系肿瘤的临床与基础研究.
作者贡献分布: 本课题由郭明洲设计; 胡随负责实验操作、资料收集、数据整理及撰写论文; 文章的修改与审校由毛高平完成.
通讯作者: 毛高平, 教授, 主任医师, 100142, 北京市海淀区阜成路30号, 中国人民解放军空军总医院消化内科. maogaoping@medmail.com
电话: 010-68410099-6232
收稿日期: 2014-05-16
修回日期: 2014-06-06
接受日期: 2014-06-16
在线出版日期: 2014-06-28
Abstract

目的: 探讨外源性bcl6b基因表达对人食管癌细胞生物学行为的影响.

方法: 应用PCR方法扩增bcl6b基因编码区, 利用脂质体转染技术将真核表达重组体pcDNA-bcl6b质粒和空载体pcDNA3.1质粒分别导入KYSE180细胞, 经G418筛选后获得稳定转染细胞克隆, Western blot检测BCL6B和P53在KYSE180细胞中的表达变化. 通过流式细胞术(FCM)分析其细胞周期及其凋亡的变化, 绘制生长曲线和克隆形成试验检测重表达bcl6b基因后食管癌细胞的增殖变化.

结果: 成功获得了稳定表达外源性bcl6b基因的KYSE180细胞系, 与转染空白载体组比较, 转染bcl6b基因的细胞, 细胞周期中G1/G0期比例明显增加(BCL6B: 47.85%±1.53% vs Vector: 40.62%±1.07%, P<0.05), S期比例减少(BCL6B: 34.40%±1.30% vs Vector: 42.31%±0.66%, P<0.01), 细胞凋亡率升高(BCL6B: 11.74%±0.99% vs Vector: 2.43%±0.70%, P<0.01); 同时P53和P21蛋白的表达水平明显升高. 转染bcl6b基因的细胞的生长速度较空载组比明显减慢.

结论: BCL6B可能通过上调P53和P21蛋白的表达水平从而抑制KYSE180细胞的恶性生物学行为.

Keywords: bcl6b; 食管癌; 增殖; 凋亡; 肿瘤; P53; P21

核心提示: 重表达bcl6b基因的细胞, 细胞周期中G1/G0期比例明显增加, S期比例减少, 细胞凋亡率升高; 转染bcl6b基因的细胞的生长速度较空载组明显减慢. 同时P53和P21蛋白的表达水平明显升高. 研究结果表明BCL6B可通过上调P53和P21蛋白的表达水平, 从而引起细胞G1/S期阻滞和诱导细胞凋亡而抑制食管癌细胞KYSE180细胞的恶性生物学行为.